Микробная экология - Microbial ecology

«Экологическая микробиология» перенаправляется сюда. Для журнала см. Экологическая микробиология (журнал).
Большая аномалия подсчета тарелок. Количество клеток, полученных путем культивирования, на порядки меньше, чем количество клеток, наблюдаемых непосредственно под микроскопом. Это связано с тем, что микробиологи могут выращивать лишь небольшую часть встречающихся в природе микробов, используя современные лабораторные методы, в зависимости от окружающей среды.[1]

Микробная экология (или же экологическая микробиология) это экология из микроорганизмы: их отношения друг с другом и с окружающей средой. Это касается трех основных домены жизни-Эукариоты, Археи, и Бактерии -а также вирусы.[2]

Микроорганизмы своей вездесущностью влияют на все биосфера. Микробная жизнь играет первостепенную роль в регулировании биогеохимический системы практически во всех средах нашей планеты, включая некоторые из самых крайний, из замороженная среда и кислые озера, чтобы гидротермальные источники на дне самых глубоких океанов, и некоторые из самых известных, таких как человеческие тонкий кишечник.[3][4] Как следствие количественной величины микробной жизни (рассчитанной как 5.0×1030 клетки; на восемь порядков больше, чем количество звезд в наблюдаемой Вселенной[5][6]) микробы, в силу их биомасса одни, составляют значительную поглотитель углерода.[7] Помимо фиксации углерода, ключевые коллективные метаболические процессы микроорганизмов (включая азотфиксация, метаболизм метана, и обмен серы ) контролировать глобальный биогеохимический цикл.[8] Масштабы производства микроорганизмов таковы, что даже при полном отсутствии эукариотической жизни эти процессы, вероятно, будут продолжаться без изменений.[9]

История

Хотя микробы изучаются с семнадцатого века, это исследование было скорее с физиологической точки зрения, чем с экологической.[10] Например, Луи Пастер и его ученики интересовались проблемой распространения микробов как на суше, так и в океане.[11] Мартинус Бейеринк изобрел культура обогащения, фундаментальный метод изучения микробы из окружающей среды. Ему часто ошибочно приписывают создание микробный биогеографический идея о том, что «все есть везде, но среда выбирает», которую высказал Лоуренс Баас Бекинг.[12] Сергей Виноградский был одним из первых исследователей, пытавшихся понять микроорганизмы вне медицинского контекста - что делает его одним из первых студентов, изучающих микробную экологию и микробиологию окружающей среды - открывая хемосинтез, и развитие Виноградский столбец в процессе.[13]:644

Однако Бейеринк и Виндоградский сосредоточили свое внимание на физиологии микроорганизмов, а не на микробиологии. среда обитания или их экологические взаимодействия.[10] Современная микробная экология была запущена Роберт Хангейт и коллеги, которые исследовали рубец экосистема. Изучение рубца потребовало от Хангейта разработки методов культивирования анаэробных микробов, и он также стал пионером количественного подхода к изучению микробов и их экологической активности, который дифференцировал относительный вклад видов и катаболические пути.[10]

Прогресс в микробной экологии связан с развитием новых технологий. Измерение скорости биогеохимических процессов в природе было обусловлено наличием радиоизотопы начиная с 1950-х гг. Например, 14CO2 позволил проанализировать скорость фотосинтеза в океане (исх.). Еще один значительный прорыв произошел в 1980-х годах, когда были разработаны микроэлектроды, чувствительные к химическим веществам, таким как O2.[14]. Эти электроды имеют пространственное разрешение 50–100 мкм и позволяют анализировать пространственную и временную биогеохимическую динамику микробных матов и отложений.

Хотя измерение скорости биогеохимических процессов могло помочь проанализировать, какие процессы происходят, они были неполными, поскольку не давали информации о том, какие конкретные микробы ответственны за это. Давно известно, что «классические» методы культивирования восстанавливают менее 1% микробов из естественной среды обитания. Однако, начиная с 1990-х годов, был разработан ряд независимых от культивирования методов для определения относительной численности микробов в среде обитания. Карл Вёзе впервые продемонстрировал, что последовательность 16S рибосомная РНК Молекула может быть использована для анализа филогенетических отношений. Нормальный темп взял эту основополагающую идею и применил ее для анализа того, «кто там» в естественной среде. Процедура включает (а) выделение нуклеиновых кислот непосредственно из естественной среды, (б) ПЦР-амплификацию последовательностей генов малой субъединицы рРНК, (в) секвенирование ампликонов и (г) сравнение этих последовательностей с базой данных последовательностей из чистые культуры и экологическая ДНК[15]. Это позволило глубже понять разнообразие микробных сред обитания. Однако он не решает, как связать определенные микробы с их биогеохимической ролью. Метагеномика, секвенирование общей ДНК, извлеченной из окружающей среды, может дать представление о биогеохимическом потенциале[16], в то время как метатранскриптомика и метапротеомика может измерить фактическое проявление генетического потенциала, но остается технически сложным[17].

Роли

Микроорганизмы - это основа всех экосистемы, но тем более в зонах, где фотосинтез невозможен из-за отсутствия света. В таких зонах хемосинтетический микробы дают энергию и углерод к другим организмам. Эти хемотрофные организмы также могут функционировать в условиях недостатка кислорода, используя другие акцепторы электронов для их дыхания.

Другие микробы разлагатели, с возможностью переработки питательные вещества из продуктов жизнедеятельности других организмов. Эти микробы играют жизненно важную роль в биогеохимических циклах.[18] В азотный цикл, то цикл фосфора, то цикл серы и цикл углерода все так или иначе зависят от микроорганизмов. Например, газообразный азот который составляет 78% земной атмосферы, недоступен для большинства организмов, пока не будет преобразован в биологически доступную форму в результате микробного процесса азотфиксация.

Из-за высокого уровня горизонтальный перенос генов среди микробных сообществ,[19] микробная экология также важна для изучения эволюция.[20]

Симбиоз

Микробы, особенно бактерии, часто вызывают симбиотический отношения (либо положительный или отрицательный ) с другими микроорганизмами или более крупными организмами. Несмотря на то, что они физически малы, симбиотические отношения между микробами важны в эукариотический процессы и их эволюция.[21][22] Типы симбиотических отношений, в которых участвуют микробы, включают: мутуализм, комменсализм, паразитизм,[23] и аменсализм,[24] и эти отношения во многом влияют на экосистему.

Мутуализм

Мутуализм в микробной экологии - это отношения между видами микробов и людьми, которые позволяют обеим сторонам получать выгоду.[25] Одним из таких примеров может быть синтрофия, также известный как перекрестное кормление,[24] из которых 'Метанобактерии омелианский 'классический пример[26][27]. Этот консорциум состоит из организма, ферментирующего этанол, и метаноген. Организм, ферментирующий этанол, обеспечивает партнера архей H2, в котором этот метаноген необходим для роста и производства метана.[21][27] Было выдвинуто предположение, что синтрофия играет важную роль в средах с ограниченным количеством энергии и питательных веществ, например, глубоко под землей, где она может помочь микробному сообществу с различными функциональными свойствами выживать, расти и производить максимальное количество энергии.[28][29] Анаэробное окисление метана (AOM) осуществляется мутуалистическим консорциумом сульфатредуцирующая бактерия и анаэробный метанокисляющая архея. [30][31] Реакция, используемая бактериальным партнером для производства H2 является эндергонический (и поэтому термодинамически неблагоприятно), однако, когда она связана с реакцией, используемой партнером архей, общая реакция становится экзергонический.[21] Таким образом, два организма находятся в мутуалистических отношениях, которые позволяют им расти и процветать в среде, смертельной для любого вида в одиночку. Лишайник является примером симбиотического организма.[27]

Комменсализм

Комменсализм очень распространен в микробном мире, что буквально означает «есть за одним столом».[32] Продукты метаболизма одной микробной популяции используются другой микробной популяцией без пользы или вреда для первой популяции. Существует множество «пар» видов микробов, которые выполняют реакцию окисления или восстановления по одному и тому же химическому уравнению. Например, метаногены производят метан за счет снижения содержания CO.2 в CH4, а метанотрофы окисляют метан обратно до CO2. [33]

Аменсализм

Аменсализм (также широко известный как антагонизм) - это тип симбиотических отношений, при которых один вид / организм страдает, а другой остается неизменным.[25] Один из примеров такой взаимосвязи, которая имеет место в микробной экологии, - это между микробными видами. Lactobacillus casei и Pseudomonas taetrolens.[34] При сосуществовании в среде Pseudomonas taetrolens показывает подавление роста и снижение производства лактобионовой кислоты (ее основного продукта), скорее всего, из-за побочных продуктов, создаваемых Lactobacillus casei во время производства молочной кислоты.[35] Однако, Lactobacillus casei не проявляет никакой разницы в своем поведении, и такое отношение можно определить как аменсализм.

Управление микробными ресурсами

Биотехнологии может использоваться наряду с экологией микробов для решения ряда экологических и экономический проблемы. Например, молекулярные методы, такие как дактилоскопия сообщества или метагеномика может использоваться для отслеживания изменений микробных сообществ с течением времени или оценки их биоразнообразие. Управление углеродным циклом до секвестра углекислый газ и предотвратить избыток метаногенез важно для смягчения глобальное потепление, и перспективы биоэнергетика расширяются за счет развития микробные топливные элементы. Управление микробными ресурсами способствует более прогрессивному подходу к болезнь, согласно которому агенты биологической борьбы предпочтительнее попыток искоренения. Потоки в микробные сообщества необходимо лучше охарактеризовать для реализации потенциала этого месторождения.[36] Кроме того, есть также клинические последствия, поскольку морские микробные симбиозы являются ценным источником существующих и новых противомикробных агентов и, таким образом, предлагают еще одно направление исследований в эволюционной гонке вооружений. устойчивость к антибиотикам, насущная проблема для исследователей.[37]

В искусственной среде и человеческом взаимодействии

Основная статья: Микробиота человека

Микробы существуют во всех сферах, включая дома, офисы, торговые центры и больницы. В 2016 г. журнал Микробиом опубликовал сборник различных работ по изучению микробной экологии застроенная среда.[38]

Исследование патогенных бактерий в больницах, проведенное в 2006 году, показало, что их способность к выживанию различается в зависимости от типа: одни выживают всего несколько дней, а другие - месяцами.[39]

Продолжительность жизни микробов в домашних условиях варьируется. Обычно бактериям и вирусам требуется влажная среда с влажностью более 10 процентов.[40] Кишечная палочка может прожить от нескольких часов до суток.[40] Бактерии, образующие споры, могут жить дольше, Золотистый стафилококк потенциально выживать в течение нескольких недель или, в случае бацилла сибирской язвы, годы.[40]

В домашних условиях домашние животные могут быть переносчиками бактерий; например, рептилии обычно являются переносчиками сальмонеллы.[41]

S. aureus особенно распространен и бессимптомно колонизирует около 30% человеческой популяции;[42] пытается деколонизировать перевозчики имели ограниченный успех[43] и обычно включают мупироцин назально и хлоргексидин промывание, возможно вместе с ванкомицином и котримоксазолом для лечения инфекций кишечника и мочевыводящих путей.[44]

Противомикробные препараты

Некоторые металлы, особенно медь и серебро, обладают антимикробными свойствами. С помощью антимикробные сенсорные поверхности из медного сплава это метод, который начали использовать в 21 веке для предотвращения передачи бактерий.[45] Наночастицы серебра также начали внедряться в строительные поверхности и ткани, хотя высказывались опасения по поводу потенциальных побочных эффектов крошечных частиц на здоровье человека.[46]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Гугенгольц, П. (2002). «Изучение прокариотического разнообразия в эпоху генома». Геномная биология. 3 (2): reviews0003.reviews0001. Дои:10.1186 / gb-2002-3-2-reviews0003. ЧВК  139013. PMID  11864374.
  2. ^ Бартон, Ларри Л .; Нортап, Дайана Э. (9 сентября 2011 г.). Микробная экология. Вили-Блэквелл. Оксфорд: Джон Уайли и сыновья. п. 22. ISBN  978-1-118-01582-7. Получено 25 мая 2013.
  3. ^ Боулер, Крис; Карл, Дэвид М .; Колвелл, Рита Р. (2009). «Микробная океанография в море возможностей». Природа. 459 (7244): 180–4. Bibcode:2009Натура.459..180Б. Дои:10.1038 / природа08056. PMID  19444203.
  4. ^ Конопка, Аллан (2009). «Что такое экология микробного сообщества?». Журнал ISME. 3 (11): 1223–30. Дои:10.1038 / ismej.2009.88. PMID  19657372.
  5. ^ Whitman, W. B .; Коулман, округ Колумбия; Вибе, WJ (1998). «Прокариоты: невидимое большинство». Труды Национальной академии наук. 95 (12): 6578–83. Bibcode:1998PNAS ... 95,6578 Вт. Дои:10.1073 / пнас.95.12.6578. JSTOR  44981. ЧВК  33863. PMID  9618454.
  6. ^ «количество звезд в наблюдаемой Вселенной - Вольфрам | Альфа». Получено 2011-11-22.
  7. ^ Редди, К. Рамеш; ДеЛон, Рональд Д. (15 июля 2004 г.). Биогеохимия водно-болотных угодий: наука и применение. Бока-Ратон: Тейлор и Фрэнсис. п. 116. ISBN  978-0-203-49145-4. Получено 25 мая 2013.
  8. ^ Делонг, Эдвард Ф. (2009). «Микробный океан от геномов до биомов» (PDF). Природа. 459 (7244): 200–6. Bibcode:2009Натура.459..200D. Дои:10.1038 / природа08059. HDL:1721.1/69838. PMID  19444206.
  9. ^ Лупп, Клаудия (2009). «Микробная океанография». Природа. 459 (7244): 179. Bibcode:2009Натура.459..179л. Дои:10.1038 / 459179a. PMID  19444202.
  10. ^ а б c Конопка, А. (2009). «Экология, микробиология». Энциклопедия микробиологии. С. 91–106. Дои:10.1016 / B978-012373944-5.00002-X. ISBN  978-0-12-373944-5.
  11. ^ Адлер, Антоний; Дюкер, Эрик (2017-04-05). «Когда пастеровская наука вышла в море: зарождение морской микробиологии». Журнал истории биологии. 51 (1): 107–133. Дои:10.1007 / s10739-017-9477-8. ISSN  0022-5010. PMID  28382585.
  12. ^ Де Вит, Рутгер; Бувье, Тьерри (2006). "'Все есть везде, но среда выбирает »; что на самом деле сказали Баас Бекинг и Бейеринк? ». Экологическая микробиология. 8 (4): 755–8. Дои:10.1111 / j.1462-2920.2006.01017.x. PMID  16584487.
  13. ^ Мэдиган, Майкл Т. (2012). Брок биология микроорганизмов (13-е изд.). Сан-Франциско: Бенджамин Каммингс. ISBN  9780321649638.
  14. ^ Revsbech, Нильс Питер; Йоргенсен, Бо Баркер (1986), Маршалл, К. С. (ред.), «Микроэлектроды: их использование в микробной экологии», Достижения в области микробной экологии, Бостон, Массачусетс: Springer US, 9, стр. 293–352, Дои:10.1007/978-1-4757-0611-6_7, ISBN  978-1-4757-0613-0, получено 2020-09-21
  15. ^ Hugerth, Luisa W .; Андерссон, Андерс Ф. (2017). «Анализ состава микробного сообщества посредством секвенирования ампликонов: от отбора проб до проверки гипотез». Границы микробиологии. 8. Дои:10.3389 / fmicb.2017.01561. ISSN  1664-302X.
  16. ^ New, Felicia N .; Брито, Илана Л. (08.09.2020). "Чему нас учит метагеномика и что упускают?". Ежегодный обзор микробиологии. 74 (1): 117–135. Дои:10.1146 / annurev-micro-012520-072314. ISSN  0066-4227.
  17. ^ Шакья, Мигун; Ло, Чиен-Чи; Цепь, Патрик С. Г. (2019). «Достижения и проблемы метатранскриптомического анализа». Границы генетики. 10. Дои:10.3389 / fgene.2019.00904. ISSN  1664-8021.
  18. ^ Фенчел, Том; Блэкберн, Генри; Кинг, Гэри М. (24 июля 2012 г.). Бактериальная биогеохимия: экофизиология круговорота минералов (3-е изд.). Бостон, Массачусетс: Academic Press / Elsevier. п. 3. ISBN  978-0-12-415974-7. Получено 25 мая 2013.
  19. ^ McDaniel, L.D .; Young, E .; Delaney, J .; Ruhnau, F .; Ritchie, K. B .; Пол, Дж. Х. (2010). «Высокая частота горизонтального переноса генов в океанах». Наука. 330 (6000): 50. Bibcode:2010Наука ... 330 ... 50М. Дои:10.1126 / science.1192243. PMID  20929803.
  20. ^ Сметс, Барт Ф .; Баркай, Тамар (2005). «Горизонтальный перенос генов: перспективы на стыке научных дисциплин». Обзоры природы Микробиология. 3 (9): 675–8. Дои:10.1038 / nrmicro1253. PMID  16145755.
  21. ^ а б c Л., Кирчман, Дэвид (2012). Процессы в микробной экологии. Оксфорд: Издательство Оксфордского университета. ISBN  9780199586936. OCLC  777261246.
  22. ^ Лопес-Гарсия, Пурификасьон; Эме, Лаура; Морейра, Дэвид (07.12.2017). «Симбиоз в эволюции эукариот». Журнал теоретической биологии. Происхождение митозирующих клеток: 50-летие классической статьи Линн Саган (Маргулис). 434 (Дополнение C): 20–33. Дои:10.1016 / j.jtbi.2017.02.031. ЧВК  5638015. PMID  28254477.
  23. ^ И., Краснер, Роберт (2010). Микробный вызов: наука, болезни и общественное здоровье (2-е изд.). Садбери, Массачусетс: издательство «Джонс и Бартлетт». ISBN  978-0763756895. OCLC  317664342.
  24. ^ а б Фауст, Каролина; Раес, Джерун (16 июля 2012 г.). «Микробные взаимодействия: от сетей к моделям». Обзоры природы. Микробиология. 10 (8): 538–550. Дои:10.1038 / nrmicro2832. PMID  22796884.
  25. ^ а б Шила., Шривастава (2003). Понимание бактерий. Шривастава П. С. (Прем С.). Дордрехт: Kluwer Academic Publishers. ISBN  978-1402016332. OCLC  53231924.
  26. ^ Bryant, M. P .; Wolin, E.A .; Wolin, M. J .; Вулф, Р. С. (1967). «Methanobacillus omelianskii, симбиотическая ассоциация двух видов бактерий». Archiv für Mikrobiologie. 59 (1–3): 20–31. Дои:10.1007 / bf00406313. ISSN  0302-8933. PMID  5602458.
  27. ^ а б c Лопес-Гарсия, Пурификасьон; Эме, Лаура; Морейра, Дэвид (декабрь 2017 г.). «Симбиоз в эволюции эукариот». Журнал теоретической биологии. Происхождение митозирующих клеток: 50-летие классической статьи Линн Саган (Маргулис). 434 (Дополнение C): 20–33. Дои:10.1016 / j.jtbi.2017.02.031. ЧВК  5638015. PMID  28254477.
  28. ^ Lau, Maggie C. Y .; Kieft, Thomas L .; Кулойо, Олукайоде; Линаж-Альварес, Борха; ван Хеерден, Эста; Линдси, Мелоди Р .; Магнабоско, Кара; Ван, Вэй; Уиггинс, Джессика Б .; Го, Линь; Перлман, Дэвид Х. (06.12.2016). «В олиготрофном глубоко-подповерхностном сообществе, зависящем от синтрофии, преобладают серные автотрофные денитрификаторы». Труды Национальной академии наук. 113 (49): E7927 – E7936. Дои:10.1073 / pnas.1612244113. ISSN  0027-8424. ЧВК  5150411. PMID  27872277.
  29. ^ Шинк, Бернхард; Стамс, Альфонс Дж. М. (2013), «Синтрофизм среди прокариот», Прокариоты, Springer Berlin Heidelberg, стр. 471–493, Дои:10.1007/978-3-642-30123-0_59, ISBN  9783642301223
  30. ^ Боэтиус, Антье; Равеншлаг, Катрин; Schubert, Carsten J .; Рикерт, Дирк; Виддел, Фридрих; Гизеке, Армин; Аманн, Рудольф; Йоргенсен, Бо Баркер; Витте, Урсула; Пфаннкуче, Олаф (октябрь 2000 г.). «Консорциум морских микробов, по-видимому, опосредующий анаэробное окисление метана». Природа. 407 (6804): 623–626. Bibcode:2000Натура.407..623Б. Дои:10.1038/35036572. ISSN  0028-0836. PMID  11034209.
  31. ^ Raghoebarsing, Ashna A .; Поль, Арьян; van de Pas-Schoonen, Katinka T .; Smolders, Alfons J.P .; Ettwig, Katharina F .; Rijpstra, W. Irene C .; Схоутен, Стефан; Дамсте, Яап С. Синнингхе; Op den Camp, Huub J.M .; Jetten, Mike S.M .; Строус, Марк (апрель 2006 г.). «Консорциум микробов сочетает анаэробное окисление метана с денитрификацией». Природа. 440 (7086): 918–921. Bibcode:2006Натура.440..918R. Дои:10.1038 / природа04617. HDL:1874/22552. ISSN  0028-0836. PMID  16612380.
  32. ^ Bogitsh, Burton J .; Картер, Клинт Э .; Ольтманн, Томас Н. (2013), «Симбиоз и паразитизм», Человеческая паразитология, Elsevier, стр. 1–13, Дои:10.1016 / b978-0-12-415915-0.00001-7, ISBN  9780124159150
  33. ^ Кэнфилд, Дональд Э .; Эрик Кристенсен; Бо Тамдруп (2005), "Структура и рост микробных популяций", Достижения в морской биологии, Elsevier, стр. 23–64, Дои:10.1016 / s0065-2881 (05) 48002-5, ISBN  9780120261475
  34. ^ Гарсия, Кристина; Рендуэлес, Мануэль; Диас, Марио (сентябрь 2017 г.). «Синбиотическая ферментация для совместного производства молочной и лактобионовой кислот из остаточной молочной сыворотки». Прогресс биотехнологии. 33 (5): 1250–1256. Дои:10.1002 / btpr.2507. PMID  28556559.
  35. ^ И., Краснер, Роберт (2010). Микробный вызов: наука, болезни и общественное здоровье (2-е изд.). Садбери, Массачусетс: издательство «Джонс и Бартлетт». ISBN  9780763756895. OCLC  317664342.
  36. ^ Verstraete, Вилли (2007). «Микробная экология и экологическая биотехнология». Журнал ISME. 1 (1): 4–8. Дои:10.1038 / ismej.2007.7. PMID  18043608.
  37. ^ Отт, Дж. (2005). Морские микробные тиотрофные эктосимбиозы. Океанография и морская биология: ежегодный обзор. 42. С. 95–118. ISBN  9780203507810.
  38. ^ «Микробиология искусственной среды». www.biomedcentral.com. Получено 2016-09-18.
  39. ^ Крамер, Аксель; Швебке, Ингеборг; Кампф, Гюнтер (16 августа 2006 г.). «Как долго нозокомиальные патогены сохраняются на неодушевленных поверхностях? Систематический обзор». BMC Инфекционные болезни. 6 (1): 130. Дои:10.1186/1471-2334-6-130. ЧВК  1564025. PMID  16914034.
  40. ^ а б c «Как долго микробы, такие как бактерии и вирусы, живут на поверхностях в доме при нормальной комнатной температуре?». Получено 2016-09-18.
  41. ^ «Сырые диеты, связанные с сальмонеллой». 2009-06-09. Получено 2016-09-18.
  42. ^ Тонг SY; Davis JS; Eichenberger E; Holland TL; Фаулер В.Г. (июль 2015 г.). «Инфекции, вызванные Staphylococcus aureus: эпидемиология, патофизиология, клинические проявления и лечение». Обзоры клинической микробиологии. 28 (3): 603–661. Дои:10.1128 / CMR.00134-14. ЧВК  4451395. PMID  26016486.
  43. ^ «Многие факторы, участвующие в деколонизации S. aureus». www.healio.com. Получено 2016-09-18.
  44. ^ Buehlmann, M .; Frei, R .; Fenner, L .; Dangel, M .; Fluckiger, U .; Видмер, А. Ф. (1 июня 2008 г.). «Высокоэффективный режим деколонизации метициллин-резистентных носителей Staphylococcus aureus» (PDF). Инфекционный контроль и больничная эпидемиология. 29 (6): 510–516. Дои:10.1086/588201. PMID  18510460.
  45. ^ «Суперэлемент для борьбы с бактериями возвращается в больницы: медь». Вашингтон Пост. Получено 2016-09-18.
  46. ^ «Наночастицы серебра убивают микробы, вызывают проблемы со здоровьем». Получено 2016-09-18.