Ингибитор тирозинкиназы Bcr-Abl - Bcr-Abl tyrosine-kinase inhibitor

Bcr-Abl ингибиторы тирозинкиназы (TKI) являются терапия первой линии для большинства пациентов с хронический миелолейкоз (CML). Более 90% случаев ХМЛ вызваны хромосомной аномалией, которая приводит к образованию так называемого Филадельфийская хромосома. Эта аномалия была обнаружена Питером Ноуэллом в 1960 году.[1] и является следствием слияния Абельсона (Abl ) ген тирозинкиназы на хромосома 9 и кластер точек разрыва (Bcr ) ген в хромосома 22, в результате чего химерный онкоген (Bcr-Abl ) и конститутивно активная тирозинкиназа Bcr-Abl, которая участвует в патогенез ХМЛ. Были разработаны соединения для селективного ингибирования тирозинкиназы.

До 2001 года США Управление по контролю за продуктами и лекарствами (FDA) одобрение иматиниб, не было доступных препаратов для изменения естественного прогрессирования ХМЛ. Только цитотоксический наркотики, такие как бусульфан, гидроксимочевина или же интерферон -альфа (rIFN-α). Хотя первый ингибитор Bcr-Abl TK был назван «волшебной пулей» для лечения рака. ВРЕМЯ журнал, второе поколение Bcr-Abl TKI было впоследствии разработано для борьбы с первоначальным сопротивление что появилось.[2]

Новые формы сопротивления могут возникать как: миссенс-мутации в киназе Abl домен, сверхэкспрессия Bcr-Abl, увеличение продукции трансмембранных белки плазмы, или конститутивная активация нижерасположенных сигнальных молекул, таких как Киназы Src-семейства.[нужна цитата ]

История

ХМЛ имеет четко определенную молекулярную мишень и относительно селективные методы лечения, нацеленные на эту мишень, чего нет в большинстве случаев рака и химиотерапия сегодня.[3] Bcr-Abl считался очень привлекательной мишенью для лекарств. вмешательство поскольку Bcr-Abl ген слияния кодирует конститутивно активированную киназу. Открытие лекарств, которые специфически нацелены на сайт связывания АТФ одной киназы, было расценено как довольно сложная задача, поскольку в мире были известны сотни протеинкиназ. человеческий геном.[4] В присутствии TKI связывание АТФ блокируется, фосфорилирование предотвращается, и клетки, экспрессирующие Bcr-Abl, либо обладают недостатком селективного роста, либо подвергаются апоптотический гибель клеток.[5][6]

Из-за растущей устойчивости и непереносимости иматиниба были предприняты усилия по разработке новых лекарств, которые могли бы ингибировать тирозинкиназу Bcr-Abl. Это привело к открытию лекарств второго поколения. В то время как для разработки иматиниба использовался скрининг лекарств, TKI второго поколения были разработаны с рациональный дизайн лекарств подход за счет увеличения знаний в структурная биология тирозинкиназы Bcr-Abl.[7]

Первое поколение

Иматиниб (STI571)

Иматиниб (Гливек) был открыт в 1992 году.[8] и считается лекарственным средством первого поколения, поскольку это первый ингибитор тирозинкиназы Bcr-Abl, который будет использоваться для лечения ХМЛ.

Разработка

Эволюция пиримидина А до иматиниба

При разработке иматиниба структура тирозинкиназы Bcr-Abl играла ограниченную роль, потому что она была неизвестна.[7] А высокопроизводительный скрининг химических библиотек в Новартис была проведена идентификация исходной молекулы, которую назвали пиримидин А. Это соединение служило соединение свинца а затем был протестирован и модифицирован для разработки иматиниба.[9] С заменой имидазол группы с бензамидогруппой, специфичность соединения увеличилась, в то время как его Мероприятия в качестве ингибитора киназ остался прежним. Впоследствии, вводя метильный заместитель орто к пиримидиниламиногруппе усиливает потенция.[4]

Привязка

Иматиниб в его сайте связывания

С того времени кристаллографические исследования показали, что иматиниб связывается с киназой домен Abl только тогда, когда домен принимает неактивную или "закрытую" конформацию.[10]Здесь богатые глицином, P-связывающая фосфатная петля (P-петля) складывается поверх АТФ сайт связывания и петля активации принимают конформацию, в которой он перекрывает сайт связывания субстрата и разрушает сайт связывания фосфата АТФ, чтобы блокировать каталитическую активность фермента.[11] Сдвиг жерехаPheGly триада на N-конце цикл активации приводит к обнажению связывающего кармана, который может использоваться ингибиторами.[12]

Иматиниб связывается с доменом Abl через шесть водородная связь взаимодействия. Это стабилизирует иматиниб Bcr-Abl и предотвращает достижение АТФ своего сайта связывания.[4][8][10] Водородные связи включают пиридин -N и позвоночник -NH из Встретились -318, аминопиримидин и боковая цепь гидроксил из Thr -315, амид-NH и боковая цепь карбоксилат из Glu -286, карбонил и основная цепь-NH Жерех -381, протонированный метилпиперазин с карбонильными атомами основной цепи Иль -360 и Его -361. Кроме того, ряд ван дер Ваальс взаимодействия способствуют связыванию.[8] А гидрофобный карман образован аминокислота остатки Иль-293, Лея -298, Leu-354 и Вал -379 вокруг фенильного кольца, прилегающего к пиперазинил -метильная группа иматиниба.[10] На момент его открытия из-за отсутствия структурной информации не удалось найти четкого объяснения впечатляющей селективности иматиниба.[6]

Хотя лечение первого поколения обеспечило чрезвычайно высокий уровень ответа и низкий уровень рецидивов у пациентов с ХМЛ, некоторые пациенты действительно испытывают сопротивление или нетерпимость к иматинибу.[2]

Устойчивость к лекарству

Устойчивость к лекарству является основной движущей силой продолжающихся исследований и разработок Bcr-Abl TKI. Вскоре после появления иматиниба исследователи начали описывать ряд in vitro полученный Сотовые линии при устойчивости к препарату.[13] За этим быстро последовало клиническое описание устойчивых к иматинибу клеток у пациентов, что привело к попыткам лучше понять биологию, лежащую в основе этих наблюдений. Оценка терапевтического ответа на иматиниб у пациентов с ХМЛ основана на совещании гематологический, цитогенные и молекулярный вехи. Пациенты, которые не могут достичь определенных ответов при заранее определенных хронологический моменты времени описываются как в первую очередь резистентные к терапии, а те, которые теряют ранее достигнутые этапы регресса заболевания, называются вторично устойчивыми.[3] Прежде чем сделать вывод, важно учесть, что ретроспектива данные показали высокую заболеваемость иматинибом не-согласие у пациентов с ХМЛ, и это может привести к нежелательным клиническим исходам.[2]

Общие механизмы устойчивости к TKI

В целом устойчивость к иматинибу можно подразделить на Bcr-Abl-зависимые и независимые механизмы. Bcr-Abl-зависимые механизмы включают сверхэкспрессию или усиление гена Bcr-Abl и точечные мутации в киназном домене Bcr-Abl, которые препятствуют связыванию иматиниба. Независимые от Bcr-Abl механизмы включают факторы, влияющие на концентрацию иматиниба в клетке, например, путем изменения притока и оттока лекарственного средства и активации независимых от Bcr-Abl путей, таких как члены семейства киназ Src.[2] Устойчивость к иматинибу также может быть вызвана другими механизмами, которые здесь не упоминаются, поскольку важность этих механизмов все еще остается под вопросом из-за отсутствия клинических данных.

Bcr-Abl-зависимые механизмы устойчивости

Дублирование Bcr-Abl

Первые сообщения об устойчивости к иматинибу описывают развитие усиление онкогена. Это ген который кодирует патогенную тирозинкиназу Bcr-Abl, дублируется в Последовательность ДНК, что приводит к более высокой экспрессии патогена.[3] Увеличение дозы иматиниба могло бы преодолеть этот вид устойчивости при условии, что тяжелая или непереносимая побочные эффекты не производятся.[2]

Мутация Bcr-Abl

Точечные мутации может вызывать аминокислотные замены внутри киназного домена белка Bcr-Abl и нарушать сайт связывания иматиниба на тирозинкиназе, что приводит к потере чувствительности к препарату. Эти мутации обычно влияют на структуру белка Bcr-Abl, приводя либо к прерыванию критических точек контакта между лекарством и белком Bcr-Abl, либо к индукции конформационного изменения, в результате чего возникает белок, с которым иматиниб не может связываться.[2]

Частота мутаций увеличивается по мере болезни, CML, прогрессирует с хроническая фаза к фаза взрыва. Наиболее важные мутации - это P-петля мутации и мутации T315I. Сообщалось также о мутациях на других участках киназы, например, на C-спираль, SH2 домен, сайт связывания субстрата, петля активации и C-терминал мочка. Некоторые из этих мутаций имеют клиническое значение, но ни одна из них не имеет большого значения. P-петля и мутации T315I.[3]

Мутация T315I

T315I - уникальная мутация из-за его устойчивости ко всем одобренным ингибиторам Bcr-Abl до появления понатиниб.[14] Это вызвано одиночным цитозин к тимин (С -> Т) базовая пара замена в положении 944 гена Abl (кодон '315' белка Abl), приводящая к аминокислоте (T) хреонин заменяется (I) солейцин в этой позиции - таким образом, "T315I". Эта замена устраняет критический кислород молекула, необходимая для водородная связь между иматинибом и киназой Abl, а также создает стерическое препятствие привязке к большинству TKI.[3]После обнаружения было установлено, что каждые 6 из 9 случаев ХМЛ на поздней стадии с устойчивостью к иматинибу несли эту мутацию.[15] T315I обеспечивает самую высокую степень устойчивости из всех мутаций как к иматинибу, так и к TKI второго поколения.[2] Понатиниб (Iclusig) пользователя Ариада был одобрен в 2013 году для использования в качестве лечения ХМЛ второй линии и является единственным лицензированным TKI, который успешно связывается с мутированной киназой T315I.

Мутации P-петли

В структуре Bcr-Abl есть две гибкие петли, связывающие АТФ. P-петля и цикл активации. Эти петли имеют специфическое расположение в неактивной конформации Bcr-Abl, которое стабилизирует базальную конформацию. Мутации в этих петлях дестабилизируют расположение петель, так что киназный домен не может принимать неактивную конформацию, необходимую для связывания иматиниба. Мутации в области P-петли являются наиболее распространенными, составляя 36–48% всех мутаций. Имеются клинические данные, указывающие на то, что мутации Bcr-Abl в P-петле в 70–100 раз менее чувствительны к иматинибу по сравнению с нативным Bcr-Abl.[2]

Bcr-Abl Независимые механизмы устойчивости

Были постулированы дополнительные механизмы для описания устойчивости, наблюдаемой в различных модельных системах, хотя ни один из них не был четко идентифицирован как единственный источник клинической устойчивости.[3]

Отток лекарств, вызванный Р-гликопротеинами

Некоторые исследования клеточных линий показали, что устойчивость к иматинибу может быть частично вызвана увеличением экспрессии Р-гликопротеин откачивающий насос. В некоторых случаях за счет использования агентов, ингибирующих активность Р-гликопротеина, была восстановлена ​​чувствительность к иматинибу.[3]

Импорт лекарств транспортером органических катионов 1

Поступление иматиниба в клетки зависит от переносчика органических катионов (1 октября ). OCT1 играет важную роль в устойчивости к иматинибу, ингибируя его приток и, таким образом, уменьшая внутриклеточную биодоступность иматиниба.[16] Пациенты с низкой экспрессией, активностью или полиморфизмом OCT1 имели значительно более низкие внутриклеточные уровни иматиниба. Ответ пациентов с низкой активностью OCT1 был значительно дозозависимым. Эти данные указывают на то, что активность OCT1 является важной детерминантой молекулярного ответа на иматиниб.[2]

Активация альтернативного сигнального пути

У некоторых групп пациентов устойчивость может быть вызвана активацией других сигнальных путей, в частности киназ семейства Src. Киназы семейства Src участвуют в передаче сигналов Bcr-Abl и опосредуют устойчивость к иматинибу путем стабилизации активной конформации Bcr-Abl, конформации, которая не связывает иматиниб. Более того, все больше данных свидетельствует о том, что киназы семейства Src также участвуют в Bcr-Abl-независимых формах устойчивости к иматинибу.

Решения

Варианты лечения резистентности или непереносимости иматиниба CML пациенты могут включать такие стратегии, как увеличение дозы иматиниба или использование лекарств второго поколения. Было показано, что повышение доз иматиниба позволяет преодолеть некоторые случаи первичной устойчивости к иматинибу, такие как дупликация Bcr-Abl, но ответ обычно кратковременный.[2] В случае резистентности или непереносимости может быть полезно проверить мутации Bcr-Abl, чтобы указать на выбор лечения второй линии, поскольку вариабельные варианты имеют разный функциональный профиль по сравнению с различными механизмами устойчивости.[14] Препараты второго поколения предлагают улучшенные потенция и большая вероятность успеха у резистентных пациентов.[2] Также растет интерес к тестированию гипотеза что введение нескольких ингибиторов киназы Abl пациентам на ранней стадии может быть использовано для отсрочки или предотвращения появления лекарственной устойчивости клоны. Комбинация двух агентов, нацеленных на разные пути вовлеченные в ХМЛ, могут значительно улучшить показатели ответа и потенциально увеличить выживаемость.[17]

Препараты второго поколения

Препараты второго поколения обладают меньшей резистентностью и непереносимостью, чем иматиниб. В настоящее время на рынке представлены препараты второго поколения: нилотиниб, дазатиниб, босутиниб и понатиниб.

Нилотиниб (AMN107)

Нилотиниб в его сайте связывания

Разработка

Нилотиниб представляет собой производное фениламинопиримидина, которое структурно связано с иматинибом.[11] Он был разработан на основе структуры комплекса Abl-иматиниб для удовлетворения потребностей, связанных с непереносимостью и устойчивостью к иматинибу.[12][17][18] Небольшие изменения были внесены в молекулу иматиниба, чтобы сделать ее более мощный и селективный в качестве ингибитора Bcr-Abl, и эти изменения привели к открытию нилотиниба. Нилотиниб является селективным ингибитором киназы Bcr-Abl.[12][17]

Нилотиниб в 10-30 раз более эффективен, чем иматиниб в отношении ингибирования активности тирозинкиназы Bcr-Abl и распространение клеток, экспрессирующих Bcr-Abl.[11][17][18][19] Препарат эффективно подавляет аутофосфорилирование Bcr-Abl на Тюр -177, который участвует в патогенезе ХМЛ.[19] Синергетический Сообщалось об активности иматиниба и нилотиниба после совместного приема. Это может быть результатом того, что лекарства поглощаются клетками с помощью разных механизмов: приток иматиниба зависит от OCT1, а нилотиниб - нет. В отличие от иматиниба, нилотиниб также не является субстратом для насоса, переносящего отток Р-гликопротеина.[17][19] Хотя двумерный молекулярные структуры этих двух препаратов могут быть похожи, они не похожи пространственный структура и молекулярные свойства.[12]

Кристаллическая структура киназного домена Abl (синий) в комплексе с нилотиниб (красный)

Привязка

Нилотиниб связывается с неактивной конформацией киназного домена Abl, в основном через липофильный взаимодействует и тем самым блокирует его каталитическую активность.[11][17] Нилотиниб связывается с киназным доменом, создавая четыре взаимодействия водородных связей с участием пиридил -N и основной NH Met-318, анилино -NH и ОН боковой цепи Thr-315, амидо-NH и карбоксилат боковой цепи Glu-286 и амидокарбонил с NH основной цепи Asp-381.[12][19] [4- (3-пиридинил) -2-пиримидинил] анилино-сегмент нилотиниба имеет тесные связывающие взаимодействия с остатками Met-318, Phe-317 и Thr-315 области в пределах сайта связывания АТФ. Оставшаяся половина соединения выходит за пределы остатка привратника Thr-315 и связывается в дополнительном кармане. 3-метилимидазольные и трифторметильные группы нилотиниба вступают в важные взаимодействия с киназным доменом Abl. Эти группы также сильно отличают форму нилотиниба от формы иматиниба. Нилотиниб также связывается с киназой посредством большого количества слабых ван-дер-ваальсовых взаимодействий.[12]

Сопротивление

Нилотиниб показал эффект против большинства мутаций (32/33), которые связаны с устойчивостью к иматинибу, но мутант T315I остается устойчивым к нилотинибу.[11][12][17] Его неэффективность против мутанта T315I, по-видимому, является следствием потери взаимодействия Н-связи между треонином-O и анилином-NH на нилотинибе и стерического конфликта между изолейцин-метильной группой и 2-метилфенилфенильной группой нилотиниба.[11] С другой стороны, устойчивость к нилотинибу связана с ограниченным спектром мутаций киназы Bcr-Abl, которые в основном влияют на P-петлю и T315I. Однако все мутации, кроме T315I, эффективно подавлялись увеличением концентрации нилотиниба.[17] Хотя нилотиниб более эффективен, чем иматиниб, возможно, что его специфический способ связывания с Abl может сделать другие участки уязвимыми для новых видов лекарственной устойчивости.[18]

Дазатиниб (BMS-354825)

Дазатиниб в его сайте связывания

Разработка

Дазатиниб это тиазолиламинопиримидин разработан как гидрохлорид соль. Это было обнаружено программой, направленной на иммунодепрессанты и в 325 раз более эффективен против клеток, экспрессирующих Bcr-Abl дикого типа, чем иматиниб.[11][18] Дазатиниб является многоцелевым ингибитором киназ семейств Bcr-Abl и Src.[11][18] Он также обладает ингибирующей активностью в отношении дополнительных киназ ниже по течению.[18][20]

Кристальная структура[21] (PDB 2GQG ) из Abl киназный домен (синий) в комплексе с дазатиниб (красный).

Привязка

Дазатиниб связывается с Abl с менее строгими конформационными требованиями, чем иматиниб, поэтому он проявляет повышенную эффективность, но пониженную селективность по сравнению с иматинибом.[18] Дазатиниб связывает как активную, так и неактивную конформацию киназы Abl, в отличие от связывания большинства других TKI только с активной формой.[22] Соединения, которые нацелены на активную конформацию, идентифицированы, но сайты связывания во всех сотнях протеинкиназ человека очень похожи. Следовательно, существует значительно больше возможностей для различий между неактивными конформациями, поэтому усилия по обнаружению высокоселективных ингибиторов киназ направлены на молекулы, которые связываются с неактивной конформацией.[11]

Дазатиниб имеет некоторые общие структурные элементы с нилотинибом, в частности, противопоставление аминопиримидина и карбоксамид группы. В аминотиазол Сегмент дазатиниба обеспечивает бидентатное Н-связывающее взаимодействие с основной цепью CO и NH Met-318, а амид-NH образует Н-связь с кислородом боковой цепи Thr-315.[11]

Сопротивление

Поскольку дазатиниб является ингибитором киназ семейства Src, он может преодолевать устойчивость за счет активации киназы семейства Src. Поскольку он не связывается с Bcr-Abl с такими же строгими конформационными требованиями, как иматиниб, он может ингибировать все мутанты киназного домена Bcr-Abl, за исключением T315I. Дазатиниб также не является субстратом насосов оттока нескольких лекарственных препаратов P-гликопротеина, таких как иматиниб. Из-за этого дазатиниб может быть активен у некоторых пациентов после неэффективности как иматиниба, так и нилотиниба.[18] Хотя дазатиниб гораздо более эффективен, чем иматиниб, возможно, как и в случае с нилотинибом, его специфический способ связывания с Abl может привести к появлению новых уязвимых участков, которые могут вызвать новые виды лекарственной устойчивости. Мутации были обнаружены в Phe317, так что это потенциально уязвимое место для этого препарата.[18]

Босутиниб (SKI-606)

Разработка

Босутиниб

Босутиниб структура основана на хинолин каркас и структурно связан с AstraZeneca хиназолин шаблон.[11] Скрининг дрожжей, зависимый от Src-киназы, позволил охарактеризовать 4-анилино-3-хинолин.карбонитрил как ингибитор Src. Сочетание характеристик этого удара и родственного соединения, а также прикрепление солюбилизирующий группы, привели к открытию босутиниба. Было высказано предположение, что это ингибитор киназы Abl, и при тестировании как таковой он оказался немного более мощным против Abl, чем Src (IC50 1,4 нМ против 3,5 нМ ).[23] Активность босутиниба была впервые описана в 2001 году, а в 2003 году он был раскрыт как ингибитор киназы Abl. Сначала считалось, что босутиниб был селективным ингибитором киназы Src, но теперь известно, что его профиль ингибирования киназы гораздо менее ограничен, чем первоначально предполагалось. Босутиниб подавляет Src, Abl и широкий спектр как тирозиновых, так и серин-треониновых киназ.[23]

Сопротивление

Босутиниб подавлял клетки, экспрессирующие различные мутации, некоторые из которых приводили к устойчивости к иматинибу, но мутация T315 была полностью устойчивой к босутинибу.[11][23] В отличие от иматиниба, нилотиниба и дазатиниба, босутиниб не является эффективным субстратом для переносчики множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) что способствует оттоку чужеродных молекул из клеток. Босутиниб даже подавляет эти белки-переносчики в более высоких концентрациях.[23]

Понатиниб (AP24534)

ARIAD Pharmaceuticals, Inc. объявила 10 сентября 2010 г., что понатиниб перорально активный Bcr-Abl TKI, эффективный против мутации T315I, был одобрен для клинических испытаний фазы II.[24]

Путь к открытию можно связать с AP23464, одним из первых конкурентных двойных ингибиторов Src / Abl АТФ компании Ariad. AP23464 был идентифицирован с использованием дизайна базового лекарственного средства и целевых синтетических библиотек тризамещенных пурин аналоги. Вещество эффективно ингибирует в наномолярном масштабе киназы Src и Bcr-Abl, включая многие распространенные мутации Bcr-Abl, устойчивые к иматинибу. Однако AP23464 не ингибирует мутацию T315I, тогда как AP24534 (понатиниб) ингибирует.[25]

Разработка

История развития понатиниба

Компания Ariad использовала сильнодействующий препарат AP23464 для дальнейшего исследования возможностей ингибирования пуриновых матриц с сердцевиной двойных ингибиторов Src / Abl. Во-первых, при поиске веществ, эффективных в отношении неактивной конформации Abl, боковая цепь, связанная с азотом на пуриновом ядре, была заменена диариламид структура, которая, как было известно, имеет высокое сродство к неактивной конформации за счет образования важных водородных связей и заполнения гидрофобных карманов на киназе. Кроме того, было установлено, что циклопентил группа на пуриновом ядре конфликтовала с богатой глицином P-петлей в этом подтверждении и, таким образом, была удалена из молекулы. Затем с тестированием in vitro на ингибирующую активность и анализами перорального всасывания in vivo более липофильный, связанный с амидом, циклопропил было обнаружено, что группа на C6 пуринового ядра демонстрирует как удовлетворительную фармакокинетику, так и эффективность. Наконец, модификации боковой цепи диариламида путем добавления отростков имидазола были вдохновлены недавно выпущенной структурой нилотиниба. Эти модификации привели к тому, что называлось AP24163. Во время этого цикла разработки Ariad протестировал несколько веществ против клеток, трансфицированных T315I-мутированной киназой Bcr-Abl, и неожиданно обнаружил, что AP24163 демонстрирует разумное ингибирующее действие помимо сильного ингибирования нативного Bcr-Abl.[26]

После этого открытия компания Ariad начала дальнейшие исследования с целью повышения эффективности соединения AP24163 против мутации T315I. Стыковка молекулы в сайт связывания АТФ киназы Bcr-Abl, мутировавшей T315I, показало, что ожидаемого стерического столкновения с изолейцином не было из-за менее стерически требовательных винил связь между пуриновым ядром и боковой цепью диариламида по сравнению с другими TKI. Первым шагом была попытка найти еще менее стерически сложную структуру. Сначала ацетилен связь была протестирована, что привело к более высокой активности, но неблагоприятной фармакокинетике. Позже более стабильный 2-бутин связь была выбрана. Для достижения этой связи ядро ​​имидазол [1,2-a] пиридина использовали в качестве исходного материала для Соногашира реакция; но фармакокинетика все еще была плохой. При разработке AP24163 добавление боковой цепи циклопропана на C8 в пуриновом ядре привело к благоприятной фармакокинетике. Затем были протестированы несколько различных боковых цепей, но наилучшие результаты были получены при полном отсутствии боковой цепи, в результате получилось вещество с удовлетворительной фармакокинетикой, но теперь со сниженной эффективностью в отношении T315I. Первым шагом к повторному увеличению потенции было изучение других TKI. Иматиниб имеет концевую метилпиперазиновую группу, которая, как было показано, образует водородную связь с карбонильным атомом кислорода остатка Ile-360 в активационной петле киназы Abl. Пиперазиновое кольцо также является обычной солюбилизирующей группой, которая может дополнительно улучшить фармакокинетические свойства молекулы. Эти предположения были подтверждены двукратным увеличением ингибирующего действия против мутантной киназы Bcr-Abl T315I, и луч света был связывание с белками плазмы вещества (названного «19а»), по-видимому, уменьшилось, что позволяет принимать меньшие дозы с той же эффективностью. Хотя препарат 19a показал хорошие пероральные фармакокинетики как у мышей, так и у крыс, он также оставался высоким. Коэффициент распределения при 6,69. Итак, в попытках еще больше снизить липофильность молекулы, было сделано замещение одного атома углерода на имидазо [1,2-a] пиридиновом ядре; что привело к тому, что сейчас известно как составной понатиниб.[27]

Понатиниб в его сайте связывания

Привязка

Рентгеноструктурный анализ понатиниба и мутантной киназы T315I Bcr-Abl показывает, что имидазо [1,2b]пиридазин ядро находится в адениновом кармане фермента. Метилфенильная группа занимает гидрофобный карман за I315, этинил связь формирует благоприятные ван-дер-ваальсовы взаимодействия с аминокислотой, а трифторметильная группа связывается с карманом, индуцированным неактивной конформационной киназой. Кроме того, в конформации киназы, в которой находится понатинb, существуют дополнительные благоприятные ван-дер-ваальсовы взаимодействия между лекарственным средством и Tyr-253 и Phe-382. Генерируются пять водородных связей, с основной цепью Met-318 в шарнирной области, с основной цепью Asp-381, с боковой цепью Glu-286 и протонированным метилпиперазином с карбонильными атомами основной цепи Ile-360 и His. -361.[28]

Было показано, что с такой структурой понатиниб имеет относительно широкий профиль киназной специфичности, который, вероятно, может быть связан с линейностью участка связывания в молекуле. Благодаря этой линейной структуре лекарство, по-видимому, избегает стерических конфликтов с гидрофобными остатками привратника TK. Несмотря на это или даже благодаря этому, понатиниб является сильнодействующим лекарством и нацелен не только на большинство известных мутаций TK Bcr-Abl, но, что наиболее важно, на T315I. Эта мутация становится обычным путем к неэффективности лечения как первой, так и второй линии. В отличие от других разрабатываемых ингибиторов таргетинга T315I, понатиниб не нацелен на киназы Aurora, что четко отличает его от них и подчеркивает важность его открытия.[28]

Бафетиниб (INNO-406)

В связи с появлением резистентности к лечению иматинибом после его запуска альтернативное лечение стало востребованным. Бафетиниб был порождением попытки создать более мощный препарат, чем иматиниб, с эффективностью против различных точечных мутаций в киназе Bcr-Abl, с меньшим количеством побочных эффектов и с более узкими спектрами киназ, а именно Lyn и Bcr-Abl.[29]

Разработка

В поисках вещества, отвечающего указанным критериям, была исследована кристаллическая структура иматиниба, связанного с Abl. Это выявило гидрофобный карман вокруг фенильного кольца, смежный с пиперазинилметильной группой иматиниба. Попытки использовать этот карман для повышения эффективности привели к добавлению различных гидрофобных групп, включая одиночные фтор, бром и хлор заместители.Наконец, было обнаружено, что трифторметильная группа в положении 3 дает наилучшие результаты с примерно 36-кратным улучшением по сравнению с иматинибом. Теперь нужно было противодействовать добавлению гидрофобной группы, чтобы поддерживать растворимость вещества. Более тщательное изучение кристаллической структуры комплекса иматиниб-киназа показало, что Tyr-236 находится в непосредственной близости от пиридинового кольца иматиниба, что позволяет предположить, что для более крупной группы там мало или совсем нет места. Имея это в виду, более гидрофильный пиримидиновое кольцо заменено на пиридин, который, как было обнаружено, увеличивает растворимость, оставляя эффективность такой же или даже немного большей. Наконец, для улучшения водородной связи пиперазинового кольца иматиниба с Ile-360 и His-361 были введены производные пирролидина и азетидина. Наиболее перспективное вещество из последних модификаций получило обозначение NS-187.[10]

Привязка

Бафетиниб в его сайте связывания

Из-за структурного сходства иматиниба и бафетиниба их связывание с Bcr-Abl также довольно похоже. Единственное заметное отличие происходит от гидрофобного взаимодействия между трифторметильной группой и гидрофобным карманом, созданным Ile-293, Leu-298, Leu-354 и Val-379. Эта группа также может быть связана со специфичностью бафетиниба в отношении Lyn, поскольку сайт связывания там почти идентичен сайту связывания Bcr-Abl.[30]

Бафетиниб имеет свое место в терапии TKI, поскольку он эффективен как против большинства мутаций, устойчивых к иматинибу (за исключением T315I), так и против некоторых мутаций, устойчивых к дазатинибу. Бафетиниб также имеет большее сродство к Bcr-Abl, чем нилотиниб (но меньше, чем дазатиниб), но нацелен только на киназы семейства Bcr-Abl и Src Lck и Lyn; с непревзойденной специфичностью, которая предполагает меньшее количество побочных эффектов.[31]

CytRx имеет бафетин в клинических испытаниях фазы II для лечения лейкемии с мая 2010 года.[32]

1,3,4 производные тиадиазола - Вещество 14

Некоторый интерес вызывают производные тиазола и тиадиазола и их способность ингибировать TK Bcr-Abl.

Разработка

Предполагаемые взаимодействия сайтов связывания вещества 14

Одна итальянская исследовательская группа обнаружила цифровой просмотр что коммерчески доступные производные тиадиазола проявляют умеренное ингибирующее действие на киназы Abl и Src.[33] Используя ядро ​​1,3,4 тиадиазола и пробуя различные группы или молекулы бензольных колец, было получено несколько различных веществ с ингибирующими свойствами. Гибкость ядра позволяла ряду конформаций веществ связываться с АТФ-сайтом киназы Abl, хотя все они связывались с активной формой киназы.[33] Дальнейшее изучение связывания показало, что положение серы, которая связывается со структурой толуола, играет важную роль в отношении связывания Abl, а также что только один из тиадиазолов азота образует водородную связь. Кроме того, компьютерный анализ структуры показал, что амидно-связанный бензол-кетон может быть заменен более подходящим тиофен звенеть.[34] Хотя следует отметить, что этот анализ проводился со сравнением кристаллической структуры Abl и дазатиниба, который является неактивной конформацией Abl, знания, полученные в результате стыковки и анализа структуры, привели к идентификации соединения, называемого веществом 14, с высокой близостью к Abl.

Привязка

Связывание вещества 14 частично аналогично дазатинибу, аминотиазольный сегмент вещества 14 осуществляет бидентатное Н-связывающее взаимодействие с основной цепью CO и NH Met-318, в то время как метокси -бензол хорошо попадает в гидрофобный карман, созданный Val 256, Ala 253, Lys 271 и Ala 380.[34] Хотя свойства связывания, аналогичные свойствам дазатиниба, позволяют предположить, что возможность получения Bcr-Abl TKI из тиазольных ядер является реальной, остается открытым вопрос, приведет ли это исследование только к аналогу дазатиниба или к новому способу ингибирования TKs.

Другие

Ребастиниб (DCC-2036) Также ингибитор TIE-2 и VEGFR-2.[35] У него была фаза 1 клинического исследования лейкозов (Ph + CML с мутацией T315I).[36] Он проходит фазу 1 клинических испытаний комбинированной терапии метастатического рака молочной железы.[37]

Асциминиб (ABL001) является ингибитором киназы Абельсона, нацеленным на миристоильный карман, чтобы аллостерически ингибировать фермент.[38] По состоянию на август 2020 года он завершил исследование III фазы ХМЛ (ASCEMBL), показав более высокую эффективность по сравнению с босутинибом.

Резюме

Препарат, средство, медикаментСтруктураВодородные связиH-связывающие аминокислотыПодтверждение привязкиОткрытиеСтатус на 2017 год
Иматиниб (STI571)Imatinib2DACS.svg6Мет-318, Thr-315, Glu-286, Asp-381, Ile-380, His-361НеактивныйСкрининг на наркотикиПродается как терапия первой линии
Нилотиниб (AMN107)Nilotinib.svg4Мет-318, Thr-315, Glu-286, Asp-381НеактивныйРациональный дизайн лекарствПродается как терапия второй линии
Дазатиниб (BMS-345825)Dasatinib.svg3Мет-318, Тр-315АктивныйРациональный дизайн лекарствПродается как терапия второй линии
Босутиниб (СКИ-606)Bosutinib.png--НеактивныйРациональный дизайн лекарствПродается как терапия второй линии
Понатиниб (AP-24534)Понатиниб2DACS.svg5Мет-318, Asp-381, Glu-286, His-381, Иль-380НеактивныйРациональный дизайн лекарствПродается как терапия второй линии
Бафетиниб (ИННО-406)Bafetinib.svg6Мет-318, Thr-315, Glu-286, Asp-381, His-361, Ile-360НеактивныйРациональный дизайн лекарствПродается как терапия второй линии

Текущее состояние - re Ph + CML

Иматиниб остается стандартным ТКИ на передовой. Нилотиниб и дазатиниб также одобрены FDA в качестве препаратов первой линии в июне и октябре 2010 года соответственно. Четыре из этих препаратов, нилотиниб, дазатиниб, босутиниб и понатиниб, одобрены для лечения резистентного к иматинибу или непереносимого ХМЛ. Данные первой линии по этим соединениям обнадеживают и предполагают, что некоторые или все из них могут заменить иматиниб в качестве передового стандарта TKI в будущем.[39]

Рекомендации

  1. ^ Новелл, Питер; Хангерфорд, Дэвид (1960). «Минутная хромосома при хроническом гранулоцитарном лейкозе человека». Наука. 132: 1497.
  2. ^ а б c d е ж грамм час я j k An, X .; Tiwari, A .; Sun, Y .; Ding, P .; Ashby Jr, C .; Чен, З. (2010). «Ингибиторы тирозинкиназы BCR-ABL в лечении хронического миелоидного лейкоза с положительной филадельфийской хромосомой: обзор». Исследование лейкемии. 34 (10): 1255–1268. Дои:10.1016 / j.leukres.2010.04.016. PMID  20537386.
  3. ^ а б c d е ж грамм Биксби, Д., Талпаз, М. (2009). «Механизмы устойчивости к ингибиторам тирозинкиназы при хроническом миелоидном лейкозе и недавние терапевтические стратегии для преодоления устойчивости». Гематология: 461-476.
  4. ^ а б c Мэнли, П.В., Коуэн-Джейкоб, С.В., Бухдангер, Э., Фаббро, Д., Фендрих, Г., Фюре, П., Мейер, Т. и Циммерманн, Дж. (2002). «Иматиниб: селективный ингибитор тирозинкиназы». Европейский журнал рака: S19-S27.
  5. ^ Шаввер, Л. К., Слэмон, Д., Ульрих, А. (2002). «Умные препараты: ингибиторы тирозинкиназы в терапии рака». Раковая клетка: 117-123.
  6. ^ а б Друкер Б. Дж. И Лайдон Н. Б. (2000). «Уроки, извлеченные из разработки ингибитора тирозинкиназы Abl для хронического миелолейкоза». Журнал клинических исследований: 3-7.
  7. ^ а б Бьюкенен, С. Г. (2003) "Структура белка: открытие селективных ингибиторов протеинкиназы". Цели: 101-108.
  8. ^ а б c Eck, M .; Мэнли, П. (2009). «Взаимодействие структурной информации и функциональных исследований в дизайне киназных лекарств: выводы из BCR-Abl». Текущее мнение в области клеточной биологии. 21 (2): 288–295. Дои:10.1016 / j.ceb.2009.01.014. PMID  19217274.
  9. ^ Mandal, S .; Moudgil, M .; Мандал, С. (2009). «Рациональный дизайн лекарств». Европейский журнал фармакологии. 625 (1–3): 90–100. Дои:10.1016 / j.ejphar.2009.06.065. PMID  19835861.
  10. ^ а б c d Asaki, T .; Sugiyama, Y .; Hamamoto, T .; Higashioka, M .; Umehara, M .; Naito, H .; Нива, Т. (2006). «Дизайн и синтез 3-замещенных производных бензамида в качестве ингибиторов Bcr-Abl киназы». Письма по биоорганической и медицинской химии. 16 (5): 1421–1425. Дои:10.1016 / j.bmcl.2005.11.042. PMID  16332440.
  11. ^ а б c d е ж грамм час я j k л Manley, P .; Cowan-Jacob, S .; Местан, Дж. (2005). «Достижения в структурной биологии, дизайне и клинической разработке ингибиторов киназы Bcr-Abl для лечения хронического миелоидного лейкоза». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Белки и протеомика. 1754 (1–2): 3–13. Дои:10.1016 / j.bbapap.2005.07.040. PMID  16172030.
  12. ^ а б c d е ж грамм Manley, P .; Stiefl, N .; Cowan-Jacob, S .; Кауфман, С .; Mestan, J .; Wartmann, M .; Wiesmann, M .; Woodman, R .; Галлахер, Н. (2010). «Структурное сходство и сравнение относительных фармакологических свойств иматиниба и нилотиниба». Биоорганическая и медицинская химия. 18 (19): 6977–6986. Дои:10.1016 / j.bmc.2010.08.026. PMID  20817538.
  13. ^ Махон (1 августа 2000 г.). Кровь. 96 (3): 1070. Отсутствует или пусто | название = (помощь)
  14. ^ а б Штейн Б., Смит Б.Д. (2010). «Варианты лечения пациентов с хроническим миелоидным лейкозом, которые устойчивы к иматинибу или не могут переносить их». Клиническая терапия: 804-820.
  15. ^ Gorre, M .; Mohammed, M .; Ellwood, K .; Hsu, N .; Paquette, R .; Rao, P.N .; Сойерс, К. Л. (2001). «Клиническая устойчивость к терапии рака STI-571, вызванная мутацией или амплификацией гена BCR-ABL». Наука. 293 (5531): 876–880. Дои:10.1126 / science.1062538. PMID  11423618. S2CID  1279564.
  16. ^ Thomas, J .; Wang, L .; Clark, R .; Пирмохамед, М. (2004). «Активный транспорт иматиниба в клетки и из них: последствия для лекарственной устойчивости». Кровь. 104 (12): 3739–3745. Дои:10.1182 / кровь-2003-12-4276. PMID  15315971.
  17. ^ а б c d е ж грамм час Jabbour, E .; Cortes, J .; Кантарджян, Х. (2009). «Нилотиниб для лечения хронического миелоидного лейкоза: обзор, основанный на фактах». Основные доказательства. 4: 207–213. Дои:10.2147 / CE.S6003. ЧВК  2899790. PMID  20694077.
  18. ^ а б c d е ж грамм час я Olivieri, A .; Манционе, Л. (2007). «Дазатиниб: новый шаг в молекулярной таргетной терапии». Анналы онкологии. 18 Дополнение 6: vi42 – vi46. Дои:10.1093 / annonc / mdm223. PMID  17591830.
  19. ^ а б c d Breccia, M .; Алимена, Г. (2010). «Нилотиниб: ингибитор тирозинкиназы второго поколения для лечения хронического миелоидного лейкоза». Исследование лейкемии. 34 (2): 129–134. Дои:10.1016 / j.leukres.2009.08.031. PMID  19783301.
  20. ^ Han, L .; Schuringa, J .; Малдер, А .; Велленга, Э. (2010). «Дазатиниб препятствует долгосрочному распространению лейкозных предшественников в подгруппе случаев острого миелоидного лейкоза». Анналы гематологии. 89 (9): 861–871. Дои:10.1007 / s00277-010-0948-7. ЧВК  2908401. PMID  20387067.
  21. ^ Tokarski, J. S .; Newitt, J. A .; Chang, C. Y .; Cheng, J.D .; Виттекинд, М .; Kiefer, S.E .; Киш, К .; Lee, F. Y .; Borzillerri, R .; Lombardo, L.J .; Xie, D .; Zhang, Y .; Клей, Х. Э. (2006). «Структура дазатиниба (BMS-354825), связанного с активированным доменом киназы ABL, проясняет его ингибирующую активность против мутантов ABL, устойчивых к иматинибу». Исследования рака. 66 (11): 5790–5797. Дои:10.1158 / 0008-5472.CAN-05-4187. PMID  16740718.
  22. ^ Агилера, Долли Джи (31 октября 2006 г.). «Дазатиниб при хроническом миелоидном лейкозе: обзор». Терапия и управление клиническими рисками. 5 (2): 281–289. Дои:10.2147 / tcrm.s3425. ЧВК  2697539. PMID  19536317.
  23. ^ а б c d Boschelli, F .; Arndt, K .; Гамбакорти-Пассерини, К. (2010). «Босутиниб: обзор доклинических исследований хронического миелолейкоза». Европейский журнал рака. 46 (10): 1781–1789. Дои:10.1016 / j.ejca.2010.02.032. PMID  20399641.
  24. ^ http://www.ariad.com
  25. ^ О'Хара, Т .; Pollock, R .; Stoffregen, E.P .; Китс, Дж. А .; Abdullah, O.M .; Moseson, E.M .; Ривера, В. М .; Tang, H .; Metcalf Ca, C.A .; Bohacek, R. S .; Wang, Y .; Sundaramoorthi, R .; Шекспир, В. С .; Dalgarno, D .; Clackson, T .; Сойер, Т. К .; Deininger, M.W .; Друкер, Б. Дж. (2004). «Ингибирование дикого типа и мутантного Bcr-Abl с помощью AP23464, мощного ингибитора онкогенной протеинкиназы на основе АТФ: последствия для ХМЛ». Кровь. 104 (8): 2532–2539. Дои:10.1182 / кровь-2004-05-1851. PMID  15256422. S2CID  6853673.
  26. ^ Huang, W .; Чжу, X .; Wang, Y .; Азам, М .; Wen, D .; Sundaramoorthi, R .; Thomas, R .; Liu, S .; Banda, G .; Lentini, S.P .; Das, S .; Xu, Q .; Keats, J .; Wang, F .; Wardwell, S .; Ning, Y .; Snodgrass, J. T .; Broudy, M. I .; Русский, К .; Daley, G.Q .; Iuliucci, J .; Dalgarno, D.C .; Clackson, T .; Сойер, Т. К .; Шекспир, У. К. (2009). «9- (аренетенил) пурины как двойные ингибиторы киназы Src / Abl, нацеленные на неактивную конформацию: дизайн, синтез и биологическая оценка». Журнал медицинской химии. 52 (15): 4743–4756. Дои:10.1021 / jm900166t. PMID  19572547.
  27. ^ Huang, W. S .; Metcalf, C.A .; Sundaramoorthi, R .; Wang, Y .; Zou, D .; Thomas, R.M .; Чжу, X .; Cai, L .; Вэнь, Д. (2010). "Открытие 3- [2- (имидазо [1,2-b] пиридазин-3-ил) этинил] -4-метил-N- {4 - [(4-метилпиперазин-1-ил) метил] -3- (трифторметил) фенил} бензамид (AP24534), мощный перорально активный пан-ингибитор киназы Абельсона кластерного региона контрольной точки (BCR-ABL), включая мутант-привратник T315I ». Журнал медицинской химии. 53 (12): 4701–19. Дои:10.1021 / jm100395q. PMID  20513156.
  28. ^ а б О'Хара, Т .; Шекспир, В .; Чжу, X .; Eide, C .; Ривера, В .; Wang, F .; Адриан, Л .; Чжоу, Т .; Huang, W .; Xu, Q .; Metcalf Ca, C.A .; Tyner, J. W .; Loriaux, M. M .; Corbin, A. S .; Wardwell, S .; Ning, Y .; Китс, Дж. А .; Wang, Y .; Sundaramoorthi, R .; Thomas, M .; Чжоу, Д .; Snodgrass, J .; Commodore, L .; Сойер, Т. К .; Dalgarno, D.C .; Deininger, M. W. N .; Druker, B.J .; Клэксон, Т. (2009). «AP24534, пан-BCR-ABL ингибитор хронического миелоидного лейкоза, эффективно ингибирует мутант T315I и преодолевает резистентность на основе мутаций». Раковая клетка. 16 (5): 401–412. Дои:10.1016 / j.ccr.2009.09.028. ЧВК  2804470. PMID  19878872.
  29. ^ Kimura, S .; Naito, H .; Segawa, H .; Kuroda, J .; Yuasa, T .; Sato, K .; Yokota, A .; Kamitsuji, Y .; Kawata, E .; Ashihara, E .; Nakaya, Y .; Naruoka, H .; Вакаяма, Т .; Насу, К .; Asaki, T .; Niwa, T .; Hirabayashi, K .; Маэкава, Т. (2005). «NS-187, мощный и селективный двойной ингибитор тирозинкиназы Bcr-Abl / Lyn, представляет собой новый агент против иматиниб-резистентной лейкемии». Кровь. 106 (12): 3948–3954. Дои:10.1182 / кровь-2005-06-2209. PMID  16105974.
  30. ^ Horio, T .; Hamasaki, T .; Inoue, T .; Вакаяма, Т .; Itou, S .; Naito, H .; Asaki, T .; Hayase, H .; Нива, Т. (2007). «Структурные факторы, способствующие двойной ингибирующей активности Abl / Lyn 3-замещенных производных бензамида». Письма по биоорганической и медицинской химии. 17 (10): 2712–2717. Дои:10.1016 / j.bmcl.2007.03.002. PMID  17376680.
  31. ^ Deguchi, Y .; Kimura, S .; Ashihara, E .; Niwa, T .; Hodohara, K .; Fujiyama, Y .; Маэкава, Т. (2008). «Сравнение иматиниба, дазатиниба, нилотиниба и INNO-406 в устойчивых к иматинибу клеточных линиях». Исследование лейкемии. 32 (6): 980–983. Дои:10.1016 / j.leukres.2007.11.008. PMID  18191450.
  32. ^ https://web.archive.org/web/20121017190653/http://www.cytrx.com/press_releases.html. Архивировано из оригинал на 2012-10-17. Получено 2013-04-08. Отсутствует или пусто | название = (помощь)
  33. ^ а б Ради, М .; Crespan, E .; Botta, G .; Falchi, F .; Maga, G .; Manetti, F .; Corradi, V .; Mancini, M .; Santucci, M .; Schenone, S .; Ботта, М. (2008). «Открытие и SAR производных 1,3,4-тиадиазола как мощных ингибиторов тирозинкиназы Abl и цитодифференцирующих агентов». Письма по биоорганической и медицинской химии. 18 (3): 1207–1211. Дои:10.1016 / j.bmcl.2007.11.112. PMID  18078752.
  34. ^ а б Manetti, F .; Falchi, F .; Crespan, E .; Schenone, S .; Maga, G .; Ботта, М. (2008). «Производные N- (тиазол-2-ил) -2-тиофенкарбоксамида в качестве ингибиторов Abl, идентифицированные скринингом коммерчески доступных соединений на основе базы данных фармакофоров». Письма по биоорганической и медицинской химии. 18 (15): 4328–4331. Дои:10.1016 / j.bmcl.2008.06.082. PMID  18621522.
  35. ^ Ребастиниб
  36. ^ Исследование безопасности и предварительной эффективности DCC-2036 у пациентов с лейкемиями (Ph + CML с мутацией T315I)
  37. ^ Ребастиниб плюс антитубулиновая терапия паклитакселом или эрибулином при метастатическом раке молочной железы
  38. ^ https://www.novartis.com/news/media-releases/novartis-investigational-novel-stamp-inhibitor-asciminib-abl001-meets-primary-endpoint-phase-iii-chronic-myeloid-leukemia-study. Отсутствует или пусто | название = (помощь)
  39. ^ Валент, П. (2010). «Стандартное лечение Ph + CML в 2010 году: как, когда и где не использовать какой ингибитор киназы BCR / ABL1?». Европейский журнал клинических исследований. 40 (10): 918–931. Дои:10.1111 / j.1365-2362.2010.02328.x. PMID  20597967.