Гемагглютинин (грипп) - Hemagglutinin (influenza)

Гемагглютинин
PDB 1hgd EBI.jpg
Идентификаторы
СимволГемагглютинин
PfamPF00509
ИнтерПроIPR001364
SCOP21hgd / Объем / СУПФАМ
OPM суперсемейство109
Белок OPM6hjq
Стержень гемагглютинина гриппа С
PDB 1flc EBI.jpg
Рентгеновская структура гликопротеина слияния гемагглютинин-эстераза вируса гриппа c
Идентификаторы
СимволHema_stalk
PfamPF08720
ИнтерПроIPR014831
SCOP21flc / Объем / СУПФАМ
OPM суперсемейство277
Белок OPM2jrd

Грипп гемагглютинин (HA) или же гемагглютинин[п] (Британский английский ) это гомотримерный гликопротеин найдено на поверхности грипп вирусы и является неотъемлемой частью его заразительности.

Гемагглютинин - это Слитый белок I класса, имея многофункциональную активность как фактор привязанности и мембранный гибридный белок. Следовательно, HA отвечает за связывание вируса гриппа. вирус к сиаловая кислота на поверхность клеток-мишеней, таких как клетки в верхнем дыхательные пути или же эритроциты,[1] вызывая в результате интернализация вируса.[2] Во-вторых, HA отвечает за слияние вирусный конверт с опозданием эндосомный мембрана после воздействия низкой pH (5.0-5.5).[3]

Название «гемагглютинин» происходит от белок способность вызывать слипание красных кровяных телец (эритроцитов) ("агглютинировать ") in vitro.[4]

Подтипы

Гемагглютинин (HA) при гриппе A имеет не менее 18 различных подтипов. Эти подтипы называются от H1 до H18. H16 был открыт в 2004 г. вирусы гриппа А изолирован от черноголовых чайки из Швеция и Норвегия. H17 был обнаружен в 2012 году у летучих мышей.[5][6] Совсем недавно H18 был обнаружен у перуанской летучей мыши в 2013 году.[7] Первые три гемагглютинина, H1, H2 и H3, находятся в человек вирусы гриппа. По филогенетическому сходству белки НА разделены на 2 группы, при этом H1, H2, H5, H6, H8, H9, H11, H12, H13, H16, H17 и H18 принадлежат к группе 1, а остальные - к группе 2.[8] Серотип вируса гриппа A определяется белками гемагглютинина (HA) и нейраминидазы (NA), присутствующими на его поверхности.[9] Нейраминидаза (NA) имеет 11 известных подтипов, поэтому вирус гриппа назван H1N1, H5N2 и т.д., в зависимости от сочетания HA и NA.

Структура гриппа, показывающая нейраминидазу, обозначенную как NA, и гемагглютинин, как HA.

Высокопатогенный вирус птичьего гриппа H5N1 было обнаружено, что заражение людей происходит с низкой скоростью. Сообщается, что сингл аминокислота Изменения в гемагглютинине типа H5 этого птичьего вируса были обнаружены у пациентов-людей, которые «могут значительно изменять рецепторную специфичность вирусов птичьего H5N1, обеспечивая им способность связываться с рецепторами, оптимальными для вирусов гриппа человека».[10][11] Это открытие, по-видимому, объясняет, как вирус H5N1, который обычно не заражает людей, может мутировать и становиться способным эффективно инфицировать человеческие клетки. Гемагглютинин вируса H5N1 был связан с высокой патогенностью этого штамма вируса гриппа, по-видимому, из-за легкости его преобразования в активную форму посредством протеолиз.[12][13]

Структура

HA представляет собой гомотримерную интегральную мембрану гликопротеин. Он имеет форму цилиндр и имеет длину примерно 13,5 нанометров.[14][15] Тример ГА состоит из трех одинаковых мономеры. Каждый мономер состоит из неповрежденной одиночной полипептидной цепи HA0 с участками HA1 и HA2, которые связаны 2 дисульфидные мостики.[16][17] Каждая область HA2 принимает структуру альфа-спиральной спиральной спирали и располагается поверх области HA1, которая представляет собой небольшой глобулярный домен, состоящий из смеси α / β конструкции.[18] Тример ГК синтезируется как неактивный. белок-предшественник HA0 предотвращает любую преждевременную и нежелательную активность слияния и должен расщепляться протеазами хозяина, чтобы быть заразным. При нейтральном pH 23 остатка около N-конец HA2, также известный как гибридный пептид, который в конечном итоге отвечает за слияние между вирусной мембраной и мембраной хозяина, спрятан в гидрофобном кармане между тримерным интерфейсом HA2.[19] В C-конец HA2, также известный как трансмембранный домен, охватывает вирусную мембрану и закрепляет белок на ней.[20]

HA1
HA1 в основном состоит из антипараллельных бета-листов.[21]
HA2
Домен HA2 содержит три длинные альфа-спирали, по одной от каждого мономера. Каждая из этих спиралей соединена гибкой петлевой областью, называемой Loop-B (остатки с 59 по 76).[22]

Функция

HA играет две ключевые функции в проникновении вирусов. Во-первых, это позволяет распознавать цель позвоночное животное клетки, осуществляемые через связывание с этими клетками ' сиаловая кислота -содержащий рецепторы. Во-вторых, после связывания он облегчает проникновение вирусного генома в клетки-мишени, вызывая слияние эндосомальной мембраны хозяина с вирусной мембраной.[23]

В частности, домен HA1 белка связывается с моносахаридной сиаловой кислотой, которая присутствует на поверхности его клеток-мишеней, обеспечивая прикрепление вирусной частицы к поверхности клетки-хозяина. Было описано, что HA17 и HA18 связывают молекулы MHC класса II в качестве рецептора для входа, а не сиаловой кислоты.[24] Затем мембрана клетки-хозяина поглощает вирус - процесс, известный как эндоцитоз, и отщипывается, образуя новый мембраносвязанный отсек внутри клетки, называемый эндосома. Затем клетка пытается начать переваривать содержимое эндосомы, подкисляя ее внутреннюю часть и превращая ее в лизосома. Как только pH внутри эндосомы падает примерно до 5,0-6,0, в белке происходит серия конформационных перестроек. Сначала слитый пептид высвобождается из гидрофобного кармана, и HA1 диссоциирует от домена HA2. Затем домен HA2 претерпевает обширное изменение конформации, которое в конечном итоге приводит две мембраны в тесный контакт.

Это так называемый "слитый пептид "который высвобождается при понижении pH, действует как молекулярный крюк для захвата, вставляя себя в эндосомную мембрану и фиксируя его. Затем HA2 повторно складывается в новую структуру (которая более стабильна при более низком pH), он" втягивает захват крючок »и притягивает эндосомную мембрану вплотную к собственной мембране вирусной частицы, заставляя их слиться вместе. Как только это произойдет, содержимое вируса, такое как вирусная РНК, высвобождается в цитоплазме клетки-хозяина и затем транспортируется в ядро клетки-хозяина для репликации.[25]

Как цель лечения

Поскольку гемагглютинин является основным поверхностным белком вируса гриппа А и необходим для процесса проникновения, он является основной мишенью для нейтрализующие антитела. Эти антитела против грипп было обнаружено, что они действуют посредством двух разных механизмов, отражающих двойные функции гемагглютинина:

Головные антитела

Немного антитела против гемагглютинина действуют, подавляя прикрепление. Это потому, что эти антитела связываются в верхней части «головы» гемагглютинина (синяя область на рисунке выше) и физически блокируют взаимодействие с сиаловая кислота рецепторы на клетках-мишенях.[26]

Стволовые антитела

Эта группа антитела действует, предотвращая мембранный сплав (Только in vitro; эффективность этих антител in vivo считается результатом антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность и система комплемента ).[27]

Стебель или область стебля HA (HA2) высоко консервированный через разные штаммы вирусов гриппа. Сохранение делает его привлекательной мишенью для широко нейтрализующих антител, нацеленных на все подтипы гриппа, а также для разработки универсальных вакцин, которые позволяют людям вырабатывать эти антитела естественным путем.[28] Его структурные изменения от конформации до слияния к конформации после слияния стимулируют слияние вирусной мембраны и мембраны хозяина. Следовательно, Антитела нацеливание на эту область может блокировать ключевые структурные изменения, которые в конечном итоге приводят к процессу слияния мембран, и, следовательно, способны обеспечить противовирусную активность против нескольких подтипов вируса гриппа. По крайней мере, один ингибитор слияния антитело Было обнаружено, что он связывается ближе к верхушке гемагглютинина и, как полагают, работает путем перекрестного связывания головок вместе, открытие которых считается первым шагом в процессе слияния мембран.[29]

Примерами являются человеческие антитела F10,[30] FI6,[31] CR6261. Они распознают сайты в области стебля / стебля (оранжевая область на рисунке справа), далеко от сайта связывания рецептора.[32][33]

В 2015 году исследователи разработали иммуноген, имитирующий ствол HA, в частности, область, где антитело связывается с вирусом антитела CR9114. Модели на грызунах и приматах, отличных от человека, при наличии иммуногена продуцировали антитела, которые могли связываться с НА при многих подтипах гриппа, включая H5N1.[34] Когда присутствует головка HA, иммунная система обычно не вырабатывает bNAb (широко нейтрализующие антитела). Вместо этого он производит антитела к голове, которые распознают только несколько подтипов. Поскольку голова отвечает за удерживание трех единиц HA вместе, HA, работающая только на основе, нуждается в собственном способе удержания вместе. Одна команда разработала самособирающиеся наночастицы на основе HA, используя белок под названием ферритин, чтобы удерживать HA вместе. Другой заменил и добавил аминокислоты для стабилизации mini-HA без надлежащей головы.

Испытания вакцины на людях в 2016 году обнаружили множество широко нейтрализующих антител, нацеленных на ствол, продуцируемый иммунной системой. Три класса очень похожих антител были получены от нескольких добровольцев, что позволяет предположить, что универсальная вакцина, производящая воспроизводимые антитела, действительно возможна.[35]

Другие агенты

Существуют также другие ингибиторы вируса гриппа, нацеленные на гемагглютинин, которые не являются антителами:[36]

  1. Арбидол
  2. Маленькие молекулы
  3. Природные соединения
  4. Белки и пептиды

Смотрите также

Примечания

[п] ^ Гемагглютинин произносится как / he-mah-Glue-tin-in /.[37][38]

Рекомендации

  1. ^ Рассел Р.Дж., Керри П.С., Стивенс Д.Д., Штайнхауэр Д.А., Мартин С.Р., Гамблин С.Дж., Скехел Дж.Дж. (ноябрь 2008 г.). «Структура гемагглютинина гриппа в комплексе с ингибитором слияния мембран». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 105 (46): 17736–41. Дои:10.1073 / pnas.0807142105. ЧВК  2584702. PMID  19004788.
  2. ^ Edinger, Thomas O .; Pohl, Marie O .; Стертц, Силке (февраль 2014 г.). «Попадание вируса гриппа А: факторы хозяина и противовирусные мишени» (PDF). Журнал общей вирусологии. 95 (Pt 2): 263–277. Дои:10.1099 / vir.0.059477-0. ISSN  1465-2099. PMID  24225499.
  3. ^ Хорват, Питер; Хелениус, Ари; Ямаути, Йохей; Банерджи, Индранил (12 июля 2013 г.). «Подробный анализ последовательных событий на ранней стадии заражения вирусом гриппа А». PLOS ONE. 8 (7): e68450. Дои:10.1371 / journal.pone.0068450. ISSN  1932-6203. ЧВК  3709902. PMID  23874633.
  4. ^ Нельсон Д.Л., Кокс М.М. (2005). Принципы биохимии Ленингера (4-е изд.). Нью-Йорк: WH Freeman.
  5. ^ Fouchier RA, Munster V, Wallensten A, Bestebroer TM, Herfst S, Smith D, Rimmelzwaan GF, Olsen B, Osterhaus AD (март 2005 г.). «Характеристика нового подтипа гемагглютинина вируса гриппа A (H16), полученного от черноголовых чаек». Журнал вирусологии. 79 (5): 2814–22. Дои:10.1128 / JVI.79.5.2814-2822.2005. ЧВК  548452. PMID  15709000.
  6. ^ Новый уникальный вирус гриппа обнаружен у летучих мышей http://www.nhs.uk/news/2012/03march/Pages/cdc-finds-h17-bat-influenza.aspx
  7. ^ Тонг С., Чжу Х, Ли И, Ши М., Чжан Дж., Буржуа М. и др. (Октябрь 2013). «Летучие мыши Нового Света являются носителями различных вирусов гриппа А». Патогены PLOS. 9 (10): e1003657. Дои:10.1371 / journal.ppat.1003657. ЧВК  3794996. PMID  24130481.
  8. ^ Sutton, Troy C .; Чакраборти, Саборни; Маллайосюла, Вамси В. А .; Lamirande, Elaine W .; Ганти, Кетаки; Бок, Кевин В .; Мур, Ян Н .; Варадараджан, Рагхаван; Суббарао, Канта (15 декабря 2017 г.). «Защитная эффективность иммуногенных вакцин на основе гемагглютининового фрагмента гемагглютинина группы 2». NPJ вакцины. 2 (1): 35. Дои:10.1038 / s41541-017-0036-2. ЧВК  5732283. PMID  29263889.
  9. ^ «Вирусы гриппа типа А». Птичий грипп (грипп). CDC. 19 апреля 2017 г.. Получено 27 августа 2018.
  10. ^ Suzuki Y (март 2005 г.). «Сиалобиология гриппа: молекулярный механизм вариации круга хозяев вирусов гриппа». Биологический и фармацевтический бюллетень. 28 (3): 399–408. Дои:10.1248 / bpb.28.399. PMID  15744059.
  11. ^ Гамбарян А., Тузиков А., Пазынина Г., Бовин Н., Балиш А., Климов А. (январь 2006 г.). «Эволюция рецепторного фенотипа вирусов гриппа A (H5)». Вирусология. 344 (2): 432–8. Дои:10.1016 / j.virol.2005.08.035. PMID  16226289.
  12. ^ Хатта М., Гао П., Халфманн П., Каваока И. (сентябрь 2001 г.). «Молекулярная основа высокой вирулентности вирусов гонконгского гриппа A H5N1». Наука. 293 (5536): 1840–2. Дои:10.1126 / science.1062882. PMID  11546875.
  13. ^ Сенне Д.А., Паниграхи Б., Каваока Ю., Пирсон Дж. Э., Сюсс Дж., Липкинд М., Кида Х., Вебстер Р. Г. (1996). «Исследование последовательности сайта расщепления гемагглютинином (HA) вирусов птичьего гриппа H5 и H7: аминокислотная последовательность в сайте расщепления HA как маркер потенциала патогенности». Заболевания птиц. 40 (2): 425–37. Дои:10.2307/1592241. JSTOR  1592241. PMID  8790895.
  14. ^ Уилсон И.А., Скехел Дж. Дж., Вили, округ Колумбия (январь 1981 г.). «Структура гликопротеина гемагглютининовой мембраны вируса гриппа при разрешении 3 A». Природа. 289 (5796): 366–73. Дои:10.1038 / 289366a0. PMID  7464906.
  15. ^ Boonstra S, Blijleven JS, Roos WH, Onck PR, van der Giessen E, van Oijen AM (май 2018 г.). «Гемагглютинин-опосредованное слияние мембран: биофизическая перспектива». Ежегодный обзор биофизики. 47 (1): 153–173. Дои:10.1146 / annurev-biophys-070317-033018. PMID  29494252.
  16. ^ Boonstra S, Blijleven JS, Roos WH, Onck PR, van der Giessen E, van Oijen AM (май 2018 г.). «Гемагглютинин-опосредованное слияние мембран: биофизическая перспектива». Ежегодный обзор биофизики. 47 (1): 153–173. Дои:10.1146 / annurev-biophys-070317-033018. PMID  29494252.
  17. ^ Ди Лелла С., Херрманн А., Майр К.М. (июнь 2016 г.). «Модуляция стабильности pH гемагглютинина вируса гриппа: стратегия адаптации клетки-хозяина». Биофизический журнал. 110 (11): 2293–2301. Дои:10.1016 / j.bpj.2016.04.035. ЧВК  4906160. PMID  27276248.
  18. ^ Smrt ST, Lorieau JL (2016), «Слияние мембран и инфекция гриппа гемагглютинином», Достижения экспериментальной медицины и биологии, Springer Singapore, 966: 37–54, Дои:10.1007/5584_2016_174, ISBN  9789811069215, PMID  27966108
  19. ^ Wiley DC, Skehel JJ (июнь 1987 г.). «Структура и функция гликопротеина гемагглютининовой мембраны вируса гриппа». Ежегодный обзор биохимии. 56 (1): 365–94. Дои:10.1146 / annurev.bi.56.070187.002053. PMID  3304138.
  20. ^ Х., Штраус, Джеймс (2008). Вирусы и болезни человека. Штраус, Эллен Г. (2-е изд.). Амстердам: Elsevier / Academic Press. ISBN  9780080553160. OCLC  630107686.
  21. ^ Уилсон И.А., Скехел Дж. Дж., Вили, округ Колумбия (январь 1981 г.). «Структура гликопротеина гемагглютининовой мембраны вируса гриппа при разрешении 3 A». Природа. 289 (5796): 366–73. Дои:10.1038 / 289366a0. PMID  7464906.
  22. ^ Стивенс Дж., Корпер А. Л., Баслер К. Ф., Таубенбергер Дж. К., Палезе П., Уилсон И. А. (март 2004 г.). «Структура нерасщепленного гемагглютинина H1 человека вымершего вируса гриппа 1918 года». Наука. 303 (5665): 1866–70. Дои:10.1126 / science.1093373. PMID  14764887.
  23. ^ Уайт Дж. М., Хоффман Л. Р., Аревало Дж. Х. и др. (1997). «Присоединение и проникновение вируса гриппа в клетки-хозяева. Основные роли гемагглютинина». In Chiu W., Burnett RM, Garcea RL (ред.). Структурная биология вирусов. Издательство Оксфордского университета. стр.80 –104.
  24. ^ Каракус, Умут; Тамамонгуд, Типрампаи; Чимински, Кевин; Ран, Вэй; Günther, Sira C .; Pohl, Marie O .; Элетто, Давиде; Джени, Чаба; Хоффманн, Доната (март 2019). «Белки MHC класса II опосредуют межвидовое проникновение вирусов гриппа летучих мышей». Природа. 567 (7746): 109–112. Дои:10.1038 / s41586-019-0955-3. ISSN  1476-4687. PMID  30787439.
  25. ^ Маир К.М., Людвиг К., Херрманн А., Зибен С. (апрель 2014 г.). «Связывание рецепторов и стабильность pH - как гемагглютинин вируса гриппа A влияет на вирусную инфекцию, специфичную для хозяина». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны. 1838 (4): 1153–68. Дои:10.1016 / j.bbamem.2013.10.004. PMID  24161712.
  26. ^ Goh BC, Rynkiewicz MJ, Cafarella TR, White MR, Hartshorn KL, Allen K, Crouch EC, Calin O, Seeberger PH, Schulten K, Seaton BA (ноябрь 2013 г.). «Молекулярные механизмы ингибирования гриппа поверхностно-активным белком D выявлены с помощью крупномасштабного молекулярно-динамического моделирования». Биохимия. 52 (47): 8527–38. Дои:10.1021 / bi4010683. ЧВК  3927399. PMID  24224757.
  27. ^ DiLillo DJ, Tan GS, Palese P, Ravetch JV (февраль 2014 г.). «Широко нейтрализующие гемагглютининовые антитела, специфичные для стеблей, требуют взаимодействия FcγR для защиты от вируса гриппа in vivo». Природа Медицина. 20 (2): 143–51. Дои:10,1038 / нм.3443. ЧВК  3966466. PMID  24412922.
  28. ^ Саутто Г.А., Кирхенбаум Г.А., Росс TM (январь 2018 г.). «На пути к универсальной вакцине против гриппа: разные подходы для одной цели». Журнал вирусологии. 15 (1): 17. Дои:10.1186 / s12985-017-0918-у. ЧВК  5785881. PMID  29370862.
  29. ^ Барби-Мартин С., Гигант Б., Бизебард Т., Колдер Л.Дж., Уортон С.А., Скехел Дж. Дж., Кноссов М. (март 2002 г.). «Антитело, которое предотвращает фузогенный переход гемагглютинина с низким pH». Вирусология. 294 (1): 70–4. Дои:10.1006 / viro.2001.1320. PMID  11886266.
  30. ^ Суй Дж., Хван В. К., Перес С., Вей Дж., Эрд Д., Чен Л. М., Сантелли Е., Стец Б., Кэдвелл Дж., Али М., Ван Х, Мураками А., Яммануру А., Хан Т., Кокс, штат Нью-Джерси, Банкстон, Лос-Анджелес, Донис РО , Liddington RC, Marasco WA (март 2009 г.). «Структурно-функциональные основы нейтрализации широкого спектра действия вирусов гриппа А птиц и человека». Структурная и молекулярная биология природы. 16 (3): 265–73. Дои:10.1038 / nsmb.1566. ЧВК  2692245. PMID  19234466.
  31. ^ Corti D, Voss J, Gamblin SJ, Codoni G, Macagno A, Jarrossay D, Vachieri SG, Pinna D, Minola A, Vanzetta F, Silacci C, Fernandez-Rodriguez BM, Agatic G, Bianchi S, Giacchetto-Sasselli I, Calder Л., Салласто Ф., Коллинз П., Хейр Л. Ф., Темпертон Н., Лангедейк Дж. П., Скехель Дж. Дж., Ланзавеккья А. (август 2011 г.). «Нейтрализующее антитело, выбранное из плазматических клеток, которое связывается с гемагглютининами гриппа A группы 1 и 2». Наука. 333 (6044): 850–6. Дои:10.1126 / science.1205669. PMID  21798894.
  32. ^ Тросби М., ван ден Бринк Э., Йонгенилен М., Пун Л.Л., Алард П., Корнелиссен Л., Баккер А., Кокс Ф., ван Девентер Э, Гуан И., Цинатл Дж., Тер Меулен Дж., Ластерс I, Карсетти Р., Пейрис М., де Круиф Дж, Гоудсмит Дж (2008). «Гетероподтипные нейтрализующие моноклональные антитела, перекрестно защищающие от H5N1 и H1N1, полученные из человеческих IgM + В-клеток памяти». PLOS ONE. 3 (12): e3942. Дои:10.1371 / journal.pone.0003942. ЧВК  2596486. PMID  19079604.
  33. ^ Экиерт Д.К., Бхабха Г., Эльслигер М.А., Фризен Р.Х., Джонгенилен М., Тросби М., Гоудсмит Дж., Уилсон И.А. (апрель 2009 г.). «Распознавание антителом высококонсервативного эпитопа вируса гриппа». Наука. 324 (5924): 246–51. Дои:10.1126 / science.1171491. ЧВК  2758658. PMID  19251591.
  34. ^ МИКУ, АЛЕКСАНДРУ (25 августа 2015 г.). «Универсальная вакцина против гриппа: исследования приближаются». ZME Science. Получено 10 июн 2016.
  35. ^ Джойс, MG; Уитли, AK; Томас, П.В. Чуанг, GY; Сото, К; Бейлер, РТ; Друз, А; Георгиев И.С.; Гиллеспи, РА; Канекиё, М; Kong, WP; Leung, K; Нарпала, SN; Прабхакаран, MS; Ян, ES; Чжан, Б; Zhang, Y; Асокан, М; Boyington, JC; Bylund, T; Дарко, S; Лис, CR; Рансье, А; Shen, CH; Ван, L; Уиттл, младший; Ву, Х; Ясин, HM; Сантос, К; Мацуока, Y; Цыбовский Ю. Baxa, U; Программа сравнительного секвенирования NISC; Малликин, JC; Суббарао, К; Дуэк, округ Колумбия; Graham, BS; Куп, РА; Ledgerwood, JE; Рёдерер, М; Шапиро, Л; Квонг, PD; Маскола, младший; McDermott, AB (28 июля 2016 г.). "Индуцированные вакциной антитела, нейтрализующие вирусы гриппа A группы 1 и 2". Клетка. 166 (3): 609–623. Дои:10.1016 / j.cell.2016.06.043. ЧВК  4978566. PMID  27453470.
  36. ^ Цзэн Л.Ю., Ян Дж., Лю С. (январь 2017 г.). «Исследуемые ингибиторы вируса гриппа, нацеленные на гемагглютинин». Заключение эксперта по исследуемым препаратам. 26 (1): 63–73. Дои:10.1080/13543784.2017.1269170. PMID  27918208.
  37. ^ Роберт С. Бойд - Газеты Knight Ridder (24 мая 2007 г.) [6 октября 2005 г.]. «Ученые соревнуются, чтобы разработать вакцину против смертельного гриппа». Mcclatchydc.com. Получено 24 мая 2018.
  38. ^ «Птичий грипп: не впадайте в панику - Harvard Health». Harvard.edu. Октябрь 2006 г.. Получено 24 мая 2018.

внешняя ссылка