Анализ секреции - Secretion assay

Анализ секреции это процесс, используемый в клеточная биология определить клетки, которые секрет конкретный белок (обычно цитокин ). Впервые он был разработан Manz et al. в 1995 г.

Обычно клетка, которая секретирует интересующий белок, выделяется с использованием комплекса антитело-антитело, который покрывает клетку и способен «улавливать» секретируемые молекулы. Затем ячейка обнаруживается другим флуорохром помеченный антитело, а затем извлекается с помощью процесса, называемого сортировка флуоресцентно-активированных клеток (FACS). Метод FACS в целом похож на метод иммуноферментный анализ (ELISA ) формат антитела, за исключением того, что инкапсулированные клетки остаются нетронутыми. Это выгодно, поскольку клетки все еще живы после того, как экстракция была произведена.

Дальнейшие достижения теперь означают, что можно извлечь секретирующие клетки, используя систему разделения на магнитной основе или используя проточный цитометр.

Существует ряд коммерческих применений для анализа секреции. Одним из таких примеров является технология Gel Microdrop (GMD), разработанная Одноклеточные системы. One Cell утверждает, что GMD обычно восстанавливает большее количество жизнеспособных секретирующих клеток, чем другие методы, игнорируя при этом любые клетки, которые не секретируют желаемый белок.

Рекомендации

• Манц, Рудольф; и другие. (Март 1995 г.). «Анализ и сортировка живых клеток по секретируемым молекулам, перемещенным в матрицу сродства к поверхности клетки». Труды Национальной академии наук. 92 (6): 1921–1925. Bibcode:1995ПНАС ... 92.1921М. Дои:10.1073 / пнас.92.6.1921. ЧВК  42394. PMID  7892200.

дальнейшее чтение

• Цуркану, Виктор; Уильямс, Нил А. (2001). «Идентификация и выделение клеток на основе секреции цитокинов: новый инструмент для исследования иммунных ответов». Природа Медицина. 7 (3): 373–376. Дои:10.1038/85533. PMID  11231640.

внешняя ссылка

• Одноклеточные системы - Технология анализа секреции Gel Microdrop (GMD).