Игла для посева - Inoculation needle

Крупным планом иглы для прививки

An игла для посева это Лабораторное оборудование используется в области микробиология передать и прививать жизнь микроорганизмы.[1] Это один из наиболее часто используемых биологических лабораторных инструментов, который может быть одноразовым или многоразовым.[1] Стандартная многоразовая посевная игла изготовлена ​​из нихром или же платина проволока прикреплена к металлической ручке.[2][3] Одноразовые иглы для посева часто изготавливаются из пластмассы. Основание иглы притупляется, в результате чего затупляется конец.[2][3]

Использует

Инокуляционные иглы в основном используются в микробиологии для изучения бактерии и грибы на полутвердых носителях. Биотехнологии, клеточная биология и иммунология может также использовать методы культивирования с использованием иглы.[2][4][5]

Применение игл для посева направлено на инокуляцию и изоляцию четко определенных областей культур и соблюдение требований наименьшего нарушения между двумя тесно переполненными колониями микробов.[5] Его также можно использовать для гарпуна при малом увеличении. микроскоп.[6]

Полосы на пластинах для штрихов инокуляцию косых культур рыбьим хвостом и инокуляцию колотых культур можно выполнить с помощью иглы для посева.[1][7] Для укола культур, в частности, требуется игла для посева, и он используется для изучения подвижности клеток, потребности микробов в кислороде с использованием Тиогликолят культуры и разжижение бактерий желатином.[2][3][4]

Операция

Стерилизация

Стерилизация посевной иглы с помощью спиртовой горелки

Игла для посева стерилизуется с помощью асептическая техника.[1][2][3][7] Открытое пламя от мусоросжигательного завода, бунзеновская горелка, или спиртовая горелка используется для пламени вдоль кончика иглы по длине, которая должна соприкасаться с инокулят.[2][3] Для облегчения манипуляций обычно держат иглу доминирующей рукой, как если бы вы держали карандаш. Игла будет гореть под углом вниз через внутренний конус пламени, пока не станет докрасна.[1] Наклон вниз минимизирует количество создаваемых микробных аэрозолей.[1][2][3]

Инокуляционные иглы необходимо стерилизовать до и после контакта с микробными формами жизни, чтобы гарантировать отсутствие загрязнения культуры, стерильных сред и окружающей среды.[1]

Передача

При инокуляции игла для инокуляции сначала используется для переноса микробных форм жизни из культуры на иглу, которая будет использоваться в дальнейших процедурах инокуляции. Источники инокулята включают бульонные культуры, косые культуры и культуры на чашках.[1][2][3][5]

Бульонная культура

Инокуляционная игла используется для переноса микроорганизмов из бульонной культуры с использованием сначала вихревой смеситель для обеспечения однородной взвеси микроорганизмов в бульоне.[1] Затем к игле применяется асептический метод. После того как игла обожжена и стерилизована, крышка культурального бульона будет снята рукой с иглы. Открытый конец бульонной культуры обжигают, чтобы снизить риск заражения и образования аэрозолей.[2][3]

Удерживая фиксированное положение иглы, культуральный бульон будет перемещаться вверх по игле до тех пор, пока кончик иглы не погрузится в воду.[3] Во время извлечения бульонной культуры игла и рука иглы не должны двигаться, чтобы предотвратить пружинящее действие.[3][5] Перенос от бульона к игле завершается обжигом открытого конца бульонной культуры и закрытием крышки при сохранении неподвижности руки с иглой.

Наклонная культура

При косом переносе культур игла для посева сначала обрабатывается асептическим методом путем обжига. Наклонный колпачок для культивирования затем удаляется и фиксируется рукой с иглой. Обжиг открытого конца скошенной культуры предотвратит загрязнение и образование аэрозолей.[2][3]

Перенос происходит, когда кончик иглы для посева входит в контакт с поверхностью агара скошенной культуры. Посевная игла при этом не должна двигаться. Наклонная культура агара будет перемещена вверх к игле, чтобы предотвратить толчки иглы.[1][3] После завершения переноса из косой культуры на иглу открытый конец культуры обрабатывают пламенем и заменяют колпачок.

Пластинчатая культура

Инокуляционная игла используется для переноса микробных организмов из пластинчатая культура к игле, предварительно простерилизовав иглу, чтобы предотвратить загрязнение. Крышка чашки с агаром затем удаляется, чтобы игла могла проникнуть в микроорганизмы, культивируемые на чашке с агаром. Крышка удерживается парящей над чашкой для культивирования, чтобы предотвратить загрязнение из окружающей среды.[1]

Игла для посева после сжигания охлаждается на незасеянной области культуры на чашке с агаром.[1] Слишком большое количество тепла убьет посевной материал при прямом контакте с горящей иглой для посева.[1] Инокуляционная игла извлекается из агаровой культуры после получения небольшой колонии и затем закрывается крышка чашки с агаром.

Прививка

Уколы культур после инокуляции посевной иглой E. coli слева направо: TSI, мягкое питательное вещество, цитратный агар Симмонса

Прививка микроорганизмов будет производиться сразу после переноса из культуры в иглу для посева. Посевной материал обычно вносят в бульонные культуры, наклонные культуры, культуры на чашках и колотые культуры.[1][2][3][4][5][7]

Бульонная культура

Инокуляционная игла используется для инокуляции стерильной бульонной культуры. Обжигание открытого конца бульона сохранит его стерильность. Бульон будет перемещаться к игле так, чтобы кончик иглы был погружен, сохраняя при этом исходное положение иглы.[1] Осторожное вращение иглы может помочь засеять микроорганизм из иглы в стерильный бульон.[1]

Затем инокулированная бульонная культура удаляется из иглы. К открытому концу бульонной культуры применяют асептические методы для предотвращения загрязнения, а иглу обжигают для стерилизации.

Наклонная культура

Инокуляционная игла используется для инокуляции косой культуры в технике инокуляции рыбьего хвоста.[1] После переноса микроорганизмов из исходной микробной культуры на иглу для посева стерильная скошенная культура снимается. Открытый конец скошенной культуры без колпачков затем обжигают. Наклон будет располагаться так, чтобы игла двигалась вверх до тех пор, пока кончик иглы для посева слегка не соприкоснется с базовой поверхностью стерильной среды.[1][2][4] Инокуляционная игла инокулирует стерильный агар путем манипуляции со средой, так что кончик иглы касается поверхности агара зигзагообразно.[1] Затем к извлеченной инокуляционной игле применяется асептический метод.

Пластинчатая культура

Посев чашечной культуры осуществляется через полосы техника изготовления штриховой пластины.[1][2][4] После подъема крышки так, чтобы она зависла над пластиной со стерильным агаром, игла для посева будет проходить по пластине в контролируемых направлениях.[1] Микробные аэрозоли могут образовываться при попадании кончика посевного материала по сторонам чашки с агаром.[1][2][4] Затем иглу для посева извлекают из засеянной культуры чашки с агаром и обжигают.

Культура удара

Инокуляционная игла - важный инструмент при инокуляции колотой культуры.[4][7] Стерильный колпачок для культивирования удаляется, и открытый конец обжигается. Затем кончик иглы и ее длина вставляются в колющий материал и останавливаются, когда кончик иглы достигает 0,5 дюйма от дна колющего материала.[7] Игла для посева извлекается из среды в том же направлении и по тому же пути, что и в среду для укола, чтобы предотвратить эффект качания, который может нарушить культуру.[4][7] Игла стерилизована пламенем.

Смотрите также

Галерея

  • 1

  • 2

  • 3

  • 4

Рекомендации

  1. ^ а б c d е ж грамм час я j k л м п о п q р s т ты v Распространенные асептические трансферы и методы прививки. С. 4–8.
  2. ^ а б c d е ж грамм час я j k л м п Дубей, Р. (2014). Практично для класса XI (2-е изд.). С. Чанд Паблишинг. ISBN  978-81-219-2417-7.
  3. ^ а б c d е ж грамм час я j k л м Махешвари, Д.К. (2002). Лаборатория микробиологии: основные правила и требования (2-е изд.). С. Чанд Паблишинг. п. 6.
  4. ^ а б c d е ж грамм час Париджа, Субхаш Чандра (2012). Учебник микробиологии и иммунологии (2-е изд.). Эльзевир. п. 38. ISBN  978-81-312-2810-4.
  5. ^ а б c d е «Отбор проб и посев». Руководство лаборатории клеточной биологии. Руководство лаборатории клеточной биологии Hendrix College и руководство по безопасности. Получено 28 октября 2016.
  6. ^ Орсков Дж. (17 января 1992 г.). «Метод выделения бактерий в чистой культуре из отдельных клеток и процедура прямого отслеживания роста бактерий на твердой среде». Журнал бактериологии. 7 (6): 547–548.
  7. ^ а б c d е ж Введение в микробиологию. Коллекция американских типовых культур. 2015. С. 10–11, 26, 28, 30–31.