Цитратный тест - Citrate test

В цитратный тест определяет способность организма использовать цитрат как единственный источник углерода и энергии.

Принцип

Бактерии инокулируют на среду, содержащую цитрат натрия и индикатор pH такие как бромтимоловый синий. Среда также содержит неорганические соли аммония, которые используются как единственный источник азота. Использование цитрата связано с ферментом цитраза, который расщепляет цитрат до оксалоацетат и ацетат. Оксалоацетат далее разбивается на пируват и диоксид углерода (CO2). Изготовление бикарбонат натрия (NaHCO3) а также аммиак (NH3) от использования цитрата натрия и солей аммония приводит к щелочному pH. Это приводит к изменению цвета среды с зеленого на синий.

Бактериальные колонии собирают с прямой проволоки и инокулируют на склоне цитрата Симмонса. агар и инкубировали в течение ночи при 37 ° C. Если организм может использовать цитрат, среда меняет свой цвет с зеленого на синий.

Раультелла плантикола
Протей myxofaciens
Две бактерии (обе Энтеробактерии ) на цитратном агаре, показывая положительный результат (слева) и отрицательный результат (правая сторона) цитратного теста.

Примеры:

Метод

Засейте цитратный агар Simmons (не засевайте сильно), используя прямую проволоку из колонии возрастом от 18 до 24 часов. Посев из бульонной культуры не рекомендуется, так как посевной материал будет слишком тяжелым. Инкубируйте при 35 ° C до семи дней.

Результаты

Положительный: рост на среде даже без изменения цвета считается положительным.[1]Изменение цвета среды будет наблюдаться, если тестируемый организм производит кислоту или щелочь во время своего роста. Обычно наблюдается изменение цвета с зеленого (нейтральный) на синий (щелочной).

Минус: роста не наблюдается.

использованная литература

  1. ^ А. Форбс, Бетти; Дэниел Ф. Сам; Алиса С. Вайсфельд (1998). Диагностическая микробиология BAILEY & SCOTT'S (десятое изд.). Дон Ладиг. п.430. ISBN  0-8151-2535-6.