Офиовирус цитрусового псороза - Citrus psorosis ophiovirus
| Офиовирус цитрусового псороза | |
|---|---|
 | |
| Электронная микрофотография из Офиовирус цитрусового псороза | |
Классификация вирусов  | |
| (без рейтинга): | Вирус |
| Область: | Рибовирия |
| Королевство: | Орторнавиры |
| Тип: | Негарнавирикота |
| Учебный класс: | Milneviricetes |
| Заказ: | Serpentovirales |
| Семья: | Аспивириды |
| Род: | Офиовирус |
| Разновидность: | Офиовирус цитрусового псороза |
| Синонимы[1] | |
Цитрусовый вирус псороза | |
Офиовирус цитрусового псороза это растение патогенный вирус заражение цитрусовые заводы по всему миру.[2] Он считается наиболее серьезным и опасным вирусным патогеном этих деревьев.
Изоляция
Египетский штамм вируса псороза цитрусовых (CPsV-EG) был выделен из естественно инфицированного цитрусового грейпфрута (Citrus Paradisi Macf.) В ARC. Было обнаружено, что грейпфрут, использованный для выделения CPsV-EG, не содержит CTV, CEVd и Citri Spiroplasma путем тестирования с помощью DTBIA, гибридизации тканевого отпечатка и окрашивания по Диену соответственно.[3]
Изолят CPsV-EG передавался от инфицированных цитрусовых к цитрусовым с помощью шприца и прививки, а травянистые растения - с помощью инокуляции указательным пальцем и шприца. Показатели древесной массы и подвоя различались в ответ на изолят CPsV-EG, что проявлялось в отсутствии ответа, реакции, чувствительности и гиперчувствительности. Частичный фрагмент РНК3 (ген белка оболочки) CPsV-EG (–1140 п.н. и –571 п.н.) амплифицировали с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) из тканей грейпфрута с использованием двух наборов праймеров, специфичных для CPsV (CPV3 и CPV4), и (PS66 и PS65) соответственно. Исследуемый вирус был идентифицирован как изолят CPsV-EG по биологическим, серологическим и молекулярным признакам. Серологические признаки представлены как антигенные детерминанты изолята CPsV-EG, относящиеся к штамму CPsV, специфичному к моноклональным антителам, где проявлялась реакция преципитации с помощью DAS-ELISA и DTBIA.[3]
CPsV-EG детектировали на основе биологической индексации путем инокуляции прививки, которая давала узор листьев дуба (OLP) по Dweet tangor и серологического анализа с помощью DAS-ELISA с использованием Mab-специфичного CPsV. CPsV-EG реагировал с различными ответами на 16 растениях-хозяевах, принадлежащих 6 семействам. Только 8 растений-хозяев являются восприимчивыми и демонстрировали видимые внешние симптомы, которые проявлялись как местные, системные и местные, за которыми следовали системные инфекции.[3]
Гистология
Молодые листья грейпфрута как здоровых, так и инфицированных CPsV-EG растений были изучены гистологически и ультраструктурно.[4]
В целом CPsV-EG-инфекция поражает верхнюю эпидермис листа, который состоит из непластинчатых клеток паренхимы, покрытых тонким слоем кутикула. Клетки, содержащие кристаллический идиобласт (CI), отсутствуют в палисадном слое и выступают в эпидермис. Сальные железы отсутствуют по сравнению со здоровым листом. Вторичный рост происходит в средней жилке и крупных боковых жилках в более мелких прожилках. Окончания вен состоят из одной трахоиды.[проверять орфографию ] прядь удлиненной паренхима клетки, заключенные в оболочку пучка, по сравнению со здоровыми.[4]
Ультраструктура пораженных листьев претерпела ряд изменений. Зараженные клетки имеют большое количество аномальных хлоропласты, митохондрии и гипертрофированные ядра. Клетки цитрусовых, инфицированных CPsV-EG, имеют митохондрии аномально удлиненной и изогнутой формы. Ядра имеют несколько темных окрашенных тел, которые смещены к периферии ядра вдоль ядерной оболочки. Иногда ядрышко имеют неправильную форму. Также обнаруживаются тельца включения, которые могут содержать вирусные частицы.[4]
Штаммы
Три египетских изолята Цитрусовый вирус псороза (CPsV-EG) - ARC, TB и TN - были получены из трех сортов цитрусовых:Грейпфрут, Балады и Пупок -соответственно. Эти изоляты различались по некоторым внешним признакам. Изоляты CPsV-EG были обнаружены с помощью биологической индексации, что дало начало узору дубовых листьев (OLP) на Dweet tangor. Три изолята были дифференцированы с использованием иммуноферментного анализа с двойным сэндвич-ферментом (DAS-ELISA), древесных индикаторных растений, дифференциальных хозяев, изоферментов и активности пероксидазы, общего содержания РНК и резервной транскрипционной полимеразной цепной реакции (RT-PCR). Тяжелый изолят (ARC) дал наивысшее значение OD (2,204) в ELISA, за ним следуют мягкий изолят (TB) (1,958) и последний латентный изолят (TN) (1,669). Эти изоляты различались также периодом инкубации, выраженностью симптомов и реакцией на чувствительность древесных индикаторных растений и дифференциальных хозяев. Изоляты CPsV-EG показали различия по фракциям изоферментов, величине RF и интенсивности по сравнению со здоровым растением. Результаты были подтверждены активностью пероксидазы, где уровень активности пероксидазы был значительно выше в листьях ARC, чем у TB и последнего TN. Общее содержание РНК в инфицированных листьях давало самое высокое содержание в ARC, за которым следовали изоляты TB, а самое низкое было зафиксировано в изоляте TN. Наконец, ОТ-ПЦР показала различия между изолятами CPsV-EG продуктов ПЦР с использованием специфического праймера (Ps66 и Ps65), где число оснований гена белка оболочки ARC изолята 571 п.н .; Изолят TB 529 п.н. и изолят TN 546 п.н.[5]
Рекомендации
- ^ "История таксономии ICTV: Офиовирус цитрусового псороза" (HTML). Международный комитет по таксономии вирусов (ICTV). Получено 14 января 2019.
- ^ К. Джелоуа, А. D'Onghia "Выявление вируса псороза цитрусовых (CPsV) и вируса тристезы цитрусовых (CTV) прямым иммуноанализом тканевого блоттинга" Options Méditerranéennes (Средиземноморский агрономический институт), Série B n. 33
- ^ а б c Ghazal, S.A .; Х.А. Эль-Дугдуг; А.А. Муса; Х. Фахми и А. Софи, 2008. Выделение и идентификация Цитрусовый вирус псороза Египетский изолят (CPsV-EG). Commun. Agric. Appl. Биол. Sci. 73 (2): 285–95.
- ^ а б c Софи, А.Р .; А.А. Муса; Х. Фахми; Газаль С.А., Х.А. El-Dougdoug, 2007. Анатомические и ультраструктурные изменения в листьях цитрусовых, инфицированных Цитрусовый вирус псороза Египетский изолят (CPsV-EG). Журнал прикладных научных исследований. 3 (6): 485–494.
- ^ El-Dougdoug, Kh.A .; С.А. Газаль; А.А. Муса; Х. Фахми и А. Софи, 2009. Дифференциация трех египетских изолятов Цитрусовый вирус псороза. Международный журнал вирусологии. 5 (2): 49–63.