СКАЗКИ-лайки - TALE-likes

Эффекторный повтор TAL
PF03377.png
Pfam логотип последовательности для его похожей на СКАЗКИ записи, созданной из СКАЗКИ, RipTAL и летучих мышей. Повтор начинается с F / L; RVD - это последний N / H.
Идентификаторы
СимволTAL_effector
PfamPF03377
ИнтерПроIPR005042

Подобные активаторам транскрипции лайки-эффекторы (СКАЗКИ-лайки) представляют собой группу бактериальных ДНК-связывающие белки названный в честь первой и все еще наиболее изученной группы, Сказки из Ксантомонады бактерии. СКАЗКИ - важные факторы болезней растений, вызываемых Ксантомонады бактерий, но известны в первую очередь своей ролью в биотехнологии в качестве программируемых ДНК-связывающих белков, особенно в контексте СКАЗКА нуклеаз. Сказки также были найдены во многих разновидностях Ralstonia solanacearum комплекс видов бактерий, в Paraburkholderia rhizoxinica штамм HKI 454, И в две неизвестные морские бактерии. Образуют ли все эти белки единую филогенетическую группу, пока неясно.

Объединяющей чертой TALE-like являются их тандемные массивы ДНК-связывающих повторов. Эти повторы, за некоторыми исключениями, имеют длину 33-35 аминокислот и состоят из двух альфа-спиралей по обе стороны гибкой петли, содержащей остатки связывания оснований ДНК, и с соседними повторами, соединенными гибкими линкерными петлями.[1] Доказательства этой общей структуры частично получены из решенных кристаллических структур TALE.[2] и Burkholderia Сказочный (летучая мышь),[3] но также из-за сохранения кода, который все любят рассказывать, чтобы распознавать последовательности ДНК. Фактически, повторы TALE, RipTAL и BAT можно смешивать и подбирать для создания функциональных ДНК-связывающих белков с различным сродством.[4]

Сказки

Сказки - это первая выявленная, наиболее изученная и самая большая группа людей, подобных СКАЗКАМ. СКАЗКИ можно найти во всем роде бактерий. Ксантомонады,[5] состоящий в основном из патогенов растений. Было показано, что все те TALE, которые были изучены, секретируются как часть системы секреции типа III в клетки растения-хозяина. Попав внутрь клетки-хозяина, они перемещаются в ядро, связывают определенные последовательности ДНК в промоторах хозяина и включают нижестоящие гены. Считается, что каждая часть этого процесса сохраняется во всех СКАЗКАХ. Единственное значимое различие между отдельными СКАЗКАМИ, основанное на современном понимании, - это конкретная последовательность ДНК, которую связывает каждая СКАЗКА. TALE даже из близкородственных штаммов различаются по составу повторов, составляющих их ДНК-связывающий домен.[6] Состав повторов определяет предпочтение связывания ДНК. В частности, положение 13 каждого повтора придает предпочтение основанию ДНК каждого повтора. Во время ранних исследований было отмечено, что почти все различия между повторами одного массива повторов TALE обнаруживаются в положениях 12 и 13, и это открытие привело к гипотезе, что эти остатки определяют предпочтение оснований.[7] Фактически, повторяющиеся положения 12 и 13, совместно именуемые повторяющимися переменными, вызывающими непереносимость (RVD), как правило, придают основную специфичность, несмотря на четкие доказательства того, что положение 13 является определяющим основание остатком.[8] В дополнение к домену повтора, TALEs также обладают рядом консервативных функций в доменах, фланкирующих повторы. К ним относятся домены для секреции типа III, ядерной локализации и активации транскрипции. Это позволяет TALE выполнять свою биологическую роль в качестве эффекторных белков, секретируемых в клетки растения-хозяина для активации экспрессии конкретных генов-хозяев.

Разнообразие и эволюция

Хотя позиции RVD обычно являются единственными переменными позициями в одном повторяющемся массиве TALE, при сравнении повторяющихся массивов разных TALE различий больше. Разнообразие TALEs среди рода Xanthomonas значительно, но особенно поразительным открытием является то, что эволюционная история, к которой можно прийти, сравнивая повторяющиеся композиции, отличается от той, которая обнаруживается при сравнении неповторяющихся последовательностей.[6] Считается, что повторяющиеся массивы TALE быстро развиваются, при этом предполагается, что ряд рекомбинаторных процессов формирует эволюцию повторяющегося массива.[5] Рекомбинация массивов повторов TALE была продемонстрирована в эксперименте с принудительным отбором.[9] Считается, что этот эволюционный динамизм стал возможным благодаря очень высокой идентичности последовательностей повторов TALE, что является уникальной особенностью TALE в отличие от других подобных TALE.

Т-ноль

Еще одна уникальная особенность TALE - это набор из четырех повторяющихся структур на N-концевом фланге основного повторяющегося массива. Было показано, что эти структуры, называемые неканоническими или вырожденными повторами, жизненно важны для связывания ДНК,[10] хотя все, кроме одного, не связываются с основаниями ДНК и, таким образом, не вносят вклад в предпочтение последовательности. Единственное исключение - repeat -1, который кодирует фиксированное предпочтение T-zero для всех TALE. Это означает, что целевым последовательностям TALE всегда предшествует тиминовое основание. Считается, что это общее для всех TALE, за исключением TalC из Xanthomonas oryzae pv. oryzae штамм AXO1947 (G1FM79).[11]

RipTALs

Эффекторный белок TAL Brg11
Идентификаторы
ОрганизмRalstonia solanacearum (штамм GMI1000)
Символbrg11
UniProtQ8XYE3

Открытие и молекулярные свойства

Это было отмечено в публикации 2002 года генома эталонного штамма. Ralstonia solanacearum GMI1000, что его геном кодирует белок, похожий на Ксантомонады СКАЗКИ.[12] На основании сходной доменной структуры и последовательностей повторов было сделано предположение, что этот ген и его гомологи в других Ralstonia Штаммы будут кодировать белки с такими же молекулярными свойствами, что и TALE, включая связывание с последовательностью ДНК. В 2013 году это подтвердили два исследования.[13][14] Эти гены и белки, которые они кодируют, называются RipTAL (Ralstonia Injection TALE-like) в соответствии со стандартной номенклатурой эффекторов Ralstonia.[15] В то время как код связывания ДНК основных повторов сохраняется с помощью TALE, RipTAL не разделяют предпочтения T-ноль, вместо этого они имеют строгое требование G-нуля.[13] Вдобавок повторы в одном массиве повторов RipTAL имеют несколько различий в последовательностях за пределами позиций RVD, в отличие от почти идентичных повторов TALE.

RipTAL были обнаружены во всех четырех филотипах R. solanacearum, что делает его наследственной чертой этого клады. Несмотря на различия во фланкирующих доменах, последовательности, которые являются мишенями для RVD, очень похожи.[16]

Биологическая роль

Несколько линий доказательств подтверждают идею о том, что RipTAL действуют как эффекторные белки, способствуя росту бактерий или болезням, манипулируя экспрессией генов растений. Они секретируются в клетки растений Система секреции типа III, который является основной системой доставки эффекторных белков.[17] Они локализуются в ядре клетки и способны функционировать как специфичные для последовательности факторы транскрипции в клетках растений.[13] Кроме того, было показано, что штамм без RipTAL растет в ткани листьев баклажана медленнее, чем штамм дикого типа.[18] Кроме того, исследование, основанное на полиморфизмах ДНК в РИПТАЛЬНЫЙ последовательности повторяющихся доменов и растения-хозяева обнаружили статистически значимую связь между растением-хозяином и вариантами повторяющегося домена.[19] Это ожидается, если RipTAL различных штаммов адаптированы к генам-мишеням в конкретных растениях-хозяевах. Несмотря на это, по состоянию на июнь 2019 гены-мишени ни для одного RipTAL не идентифицированы..

Летучие мыши

Burkholderia TALE-like белок 1
Идентификаторы
ОрганизмParaburkholderia rhizoxinica
Символbat1
UniProtE5AV36

Открытие

Публикация генома бактериального штамма Paraburkholderia rhizoxinica HKI 454, 2011 г. [20] привело к открытию набора генов, подобных TALE, которые по своей природе значительно отличались от TALEs и RipTALS. Белки, кодируемые этими генами, были изучены на предмет их связывающих свойств с ДНК двумя группами независимо и названы летучими мышами (Burkholderia TALE-like; E5AV36) или BurrH.[21][22] Это исследование показало, что повторяющиеся единицы Burkholderia СКАЗКИ связывают ДНК с тем же кодом, что и СКАЗКИ, и регулируются 13-м положением каждого повтора. Однако есть ряд отличий.

Биологическая роль

Burkholderia Сказки-подобные состоят почти полностью из повторов, в них отсутствуют большие неповторяющиеся домены, фланкирующие повторы в TALE и RpTAL. Эти домены являются ключевыми для функций TALE и RipTAL, позволяя им проникать в ядро ​​растения и включать экспрессию генов. Поэтому в настоящее время неясно, какова биологическая роль Burkholderia СКАЗКИ-лайки есть. Ясно то, что они не являются эффекторными белками, секретируемыми в клетки растений, чтобы действовать как факторы транскрипции, биологическая роль TALEs и RipTALs. Неудивительно, что они могут отличаться по биологической роли от TALE и RipTAL, поскольку образ жизни бактерий, от которых они происходят, очень не похож на образ жизни бактерий, несущих TALE и RipTAL. Б. rhizoxinica эндосимбионт, живущий внутри гриба, в отличие от Ризоп микроспор, возбудитель растений. Этот же грибок также является условно-патогенным микроорганизмом человека у пациентов с ослабленным иммунитетом, но тогда как Б. rhizoxinica необходим для патогенности растений-хозяев, но не имеет отношения к инфицированию человека.[23] Неясно, были ли Burkholderia Сказки всегда секретируются либо в гриб, не говоря уже о растениях-хозяевах.

Использование в биотехнологии

Как отмечается в публикациях по Burkholderia Как и в случае с TALE, использование этих белков в качестве каркаса для программируемых ДНК-связывающих белков, действующих в качестве факторов транскрипции или дизайнерских нуклеаз, может иметь некоторые преимущества по сравнению с TALE.[21][22] Он был сплавлен с FokI нуклеаза, аналогичная ТАЛЕН.[3] Преимущества включают более короткий размер повтора, более компактную доменную структуру (отсутствие больших неповторяющихся доменов), большее разнообразие повторов последовательностей, что позволяет использовать ПЦР для кодирующих их генов и делает их менее уязвимыми для рекомбинаторной потери повторов. Кроме того, у Burkholderia TALE-like отсутствует требование Т-нуля, ослабляющее ограничения на выбор ДНК-мишени. Тем не менее, было опубликовано немного случаев использования Burkholderia TALE-like в качестве программируемых связывающих ДНК белков, помимо оригинальных публикаций с характеристиками.

MOrTL

Открытие

В 2007 году результаты метагеномный охват Мирового океана Институт Дж. Крейга Вентера стали общедоступными.[24] Статья 2014 г. Burkholderia СКАЗКИ-лайки [22] был также первым, кто сообщил, что две записи из этой базы данных напоминают сказки, основанные на сходстве последовательностей. В 2015 году они были дополнительно охарактеризованы и оценены на предмет их ДНК-связывающего потенциала.[25] Было обнаружено, что повторяющиеся единицы, кодируемые этими последовательностями, опосредуют связывание ДНК с предпочтением оснований, совпадающим с кодом TALE, и, как было установлено, вероятно, образуют структуры, почти идентичные повторам Bat1 на основании молекулярная динамика симуляции. Поэтому белки, кодируемые этими последовательностями ДНК, были обозначены как TALE-like морских организмов (MOrTL) 1 и 2 (GenBank: ECG96325, EBN91409).[25] Подобные последовательности, обнаруженные в метагеномах, включают: EBN19408 и ECR81667.[26]

Эволюционные отношения с другими сказками

Хотя повторы MOrTL1 и 2 структурно и функционально соответствуют норме, подобной TALE, они значительно отличаются на уровне последовательности как от всех других TALE-подобных, так и друг от друга. Неизвестно, действительно ли они гомологичны другим СКАЗКАМ и, таким образом, вместе с СКАЗКАМИ, РИПТАЛАМИ и Летучими мышами составляют истинное белковая семья. С другой стороны, они могли развиваться независимо. Особенно трудно судить об их отношении к другим СКАЗКАМ, потому что почти ничего не известно об организмах, от которых происходят MOrTL1 и MOrTL2. Известно только то, что они были обнаружены в двух отдельных пробах морской воды из Мексиканского залива и, вероятно, были бактериями на основании исключения по размеру до секвенирования ДНК.[25]

Легальное положение

Патент на BAT и морские TALE-подобные в белковой инженерии был подан в июле 2012 г. По состоянию на май 2019 г., в настоящее время он ожидает рассмотрения во всех юрисдикциях.[27]

Рекомендации

  1. ^ Дэн Д., Ян Ц., Ву Дж., Пань X, Ян Н. (апрель 2014 г.). "Возвращаясь к СКАЗКЕ повторяется". Белки и клетки. 5 (4): 297–306. Дои:10.1007 / s13238-014-0035-2. ЧВК  3978159. PMID  24622844.
  2. ^ Дэн Д., Ян Ц., Пан Х, Махфуз М., Ван Дж., Чжу Дж. К., Ши Й., Ян Н. (февраль 2012 г.). «Структурная основа для последовательного распознавания ДНК эффекторами TAL». Наука. 335 (6069): 720–3. Bibcode:2012Наука ... 335..720D. Дои:10.1126 / science.1215670. ЧВК  3586824. PMID  22223738.
  3. ^ а б Стелла С., Молина Р., Лопес-Мендес Б., Джуллерат А., Бертонати С., Дабусси Ф., Кампос-Оливас Р., Дюшато П., Монтойя Г. (июль 2014 г.). "BuD, ДНК-связывающий домен спираль-петля-спираль для модификации генома". Acta Crystallographica. Раздел D, Биологическая кристаллография. 70 (Pt 7): 2042–52. Дои:10.1107 / S1399004714011183. ЧВК  4089491. PMID  25004980.
  4. ^ де Ланге О., Шандри Н., Вундерлих М., Берендзен К.В., Лахайе Т. (январь 2017 г.). «Использование разнообразия последовательностей TALE-подобных повторов для изменения силы взаимодействий dTALE-промотор». Синтетическая биология. 2 (1). Дои:10.1093 / synbio / ysx004.
  5. ^ а б Феррейра Р.М., де Оливейра А.С., Морейра Л.М., Беласк Дж., Гурбейр Э., Сигье П., Ферро М.И., Ферро Дж.А., Чандлер М., Варани А.М. (февраль 2015 г.). «СКАЗКА о транспозиции: Tn3-подобные транспозоны играют важную роль в распространении детерминант патогенности Xanthomonas citri и других ксантомонад». мБио. 6 (1): e02505-14. Дои:10,1128 / мБио.02505-14. ЧВК  4337579. PMID  25691597.
  6. ^ а б Перес-Кинтеро А.Л., Лами Л., Гордон Дж. Л., Эскалон А., Куннак С., Сзурек Б., Гагневин Л. (3 августа 2015 г.). «QueTAL: набор инструментов для классификации и сравнения эффекторов TAL функционально и филогенетически». Границы растениеводства. 6: 545. Дои:10.3389 / fpls.2015.00545. ЧВК  4522561. PMID  26284082.
  7. ^ Бох Дж, Шорнак С (2010). «Разгадайте загадку 20-летия» (PDF). IS-MPMI Reporter (1): 3–4.
  8. ^ де Ланге О., Биндер А., Лахайе Т. (июнь 2014 г.). «От мертвого листа к новой жизни: эффекторы TAL как инструменты синтетической биологии». Журнал растений. 78 (5): 753–71. Дои:10.1111 / tpj.12431. PMID  24602153.
  9. ^ Ян Б., Сугио А., Белый Ф. Ф. (февраль 2005 г.). «Предотвращение распознавания хозяином за счет изменений в повторяющихся и С-концевых областях AvrXa7, эффектора типа III Xanthomonas oryzae pv. Oryzae». Молекулярные взаимодействия растений и микробов. 18 (2): 142–9. Дои:10.1094 / MPMI-18-0142. PMID  15720083.
  10. ^ Гао Х, Ву Х, Чай Дж., Хань З. (декабрь 2012 г.). «Кристаллическая структура белка TALE показывает расширенную N-концевую область связывания ДНК». Клеточные исследования. 22 (12): 1716–20. Дои:10.1038 / cr.2012.156. ЧВК  3515758. PMID  23147789.
  11. ^ Yu Y, Streubel J, Balzergue S, Champion A, Boch J, Koebnik R, Feng J, Verdier V, Szurek B (сентябрь 2011 г.). «Колонизация пластинок рисового листа африканским штаммом Xanthomonas oryzae pv. Oryzae зависит от нового эффектора TAL, который индуцирует ген Os11N3 нодулина-3 риса». Молекулярные взаимодействия растений и микробов. 24 (9): 1102–13. Дои:10.1094 / MPMI-11-10-0254. PMID  21679014.
  12. ^ Саланубат М., Генин С., Артигенав Ф, Гузи Дж., Манджено С., Арлат М., Бийо А, Броттье П., Камю Дж. К., Каттолико Л., Чандлер М., Шуан Н., Клодель-Ренар С., Куннак С., Деманж Н., Гаспин С., Lavie M, Moisan A, Robert C., Saurin W., Schiex T., Siguier P, Thébault P, Whalen M, Wincker P, Levy M, Weissenbach J, Boucher CA (январь 2002 г.). «Последовательность генома растительного возбудителя Ralstonia solanacearum». Природа. 415 (6871): 497–502. Дои:10.1038 / 415497a. PMID  11823852.
  13. ^ а б c de Lange O, Schreiber T., Schandry N, Radeck J, Braun KH, Koszinowski J, Heuer H, Strauß A, Lahaye T. (август 2013 г.). «Нарушение ДНК-связывающего кода эффекторов TAL Ralstonia solanacearum открывает новые возможности для создания генов устойчивости растений против бактериального увядания». Новый Фитолог. 199 (3): 773–86. Дои:10.1111 / nph.12324. PMID  23692030.
  14. ^ Ли Л., Атеф А., Пиатек А., Али З., Пиатек М., Ауида М., Шаракуу А., Махджуб А., Ван Г., Хан С., Федоров Н. В., Чжу Дж. К., Махфуз М. М. (июль 2013 г.). «Характеристика и специфичность связывания ДНК TAL-подобных эффекторов Ralstonia». Молекулярный завод. 6 (4): 1318–30. Дои:10.1093 / mp / sst006. ЧВК  3716395. PMID  23300258.
  15. ^ Пеэтерс Н., Каррер С., Анисимова М., Пленер Л., Казале А.С., Генин С. (декабрь 2013 г.). «Репертуар, унифицированная номенклатура и эволюция набора эффекторных генов типа III в комплексе видов Ralstonia solanacearum». BMC Genomics. 14 (1): 859. Дои:10.1186/1471-2164-14-859. ЧВК  3878972. PMID  24314259.
  16. ^ Шандри Н., де Ланге О., Приор П., Лахайе Т. (17 августа 2016 г.). «Эффекторы, подобные сказке, являются наследственной особенностью комплекса видов Ralstonia solanacearum и сходятся в специфичности нацеливания на ДНК». Границы растениеводства. 7: 1225. Дои:10.3389 / fpls.2016.01225. ЧВК  4987410. PMID  27582755.
  17. ^ Мукаихара Т., Тамура Н., Ивабучи М. (март 2010 г.). «Полногеномная идентификация большого репертуара эффекторных белков Ralstonia solanacearum типа III с помощью нового функционального скрининга». Молекулярные взаимодействия растений и микробов. 23 (3): 251–62. Дои:10.1094 / mpmi-23-3-0251. PMID  20121447.
  18. ^ Macho AP, Guidot A, Barberis P, Beuzón CR, Genin S (сентябрь 2010 г.). «Анализ конкурентного индекса идентифицирует несколько эффекторных мутантных штаммов Ralstonia solanacearum типа III с пониженной пригодностью для растений-хозяев». Молекулярные взаимодействия растений и микробов. 23 (9): 1197–205. Дои:10.1094 / MPMI-23-9-1197. PMID  20687809.
  19. ^ Heuer H, Yin YN, Xue QY, Smalla K, Guo JH (июль 2007 г.). «Разнообразие повторяющихся доменов avrBs3-подобных генов в штаммах Ralstonia solanacearum и ассоциация с предпочтениями хозяина в этой области». Прикладная и экологическая микробиология. 73 (13): 4379–84. Дои:10.1128 / AEM.00367-07. ЧВК  1932761. PMID  17468277.
  20. ^ Лакнер Г., Мебиус Н., Партида-Мартинес LP, Боланд С., Хертвек С. (май 2011 г.). «Эволюция эндогрибкового образа жизни: выводы из генома Burkholderia rhizoxinica». BMC Genomics. 12 (1): 210. Дои:10.1186/1471-2164-12-210. ЧВК  3102044. PMID  21539752.
  21. ^ а б де Ланге О., Вольф С., Дитце Дж., Эльзессер Дж., Морбитцер Р., Лахайе Т. (июнь 2014 г.). «Программируемые ДНК-связывающие белки от Burkholderia позволяют по-новому взглянуть на TALE-подобный повторяющийся домен». Исследования нуклеиновых кислот. 42 (11): 7436–49. Дои:10.1093 / нар / gku329. ЧВК  4066763. PMID  24792163.
  22. ^ а б c Juillerat A, Bertonati C, Dubois G, Guyot V, Thomas S, Valton J, Beurdeley M, Silva GH, Daboussi F, Duchateau P (январь 2014 г.). «BurrH: новый модульный ДНК-связывающий белок для геномной инженерии». Научные отчеты. 4: 3831. Bibcode:2014НатСР ... 4E3831J. Дои:10.1038 / srep03831. ЧВК  5379180. PMID  24452192.
  23. ^ Partida-Martinez LP, Bandemer S, Rüchel R, Dannaoui E, Hertweck C (май 2008 г.). «Отсутствие доказательств наличия эндосимбиотических токсин-продуцирующих бактерий в клинических изолятах Rhizopus». Микозы. 51 (3): 266–9. Дои:10.1111 / j.1439-0507.2007.01477.x. PMID  18399908.
  24. ^ Юсеф С., Саттон Дж., Руш Д. Б., Халперн А. Л., Уильямсон С. Дж., Ремингтон К., Эйзен Дж. А., Гейдельберг КБ, Мэннинг Дж., Ли В., Ярошевский Л., Цеплак П., Миллер С. С., Ли Х., Машияма С. Т., Иоахимиак М. П., ван Белль C, Chandonia JM, Soergel DA, Zhai Y, Natarajan K, Lee S, Raphael BJ, Bafna V, Friedman R, Brenner SE, Godzik A, Eisenberg D, Dixon JE, Taylor SS, Strausberg RL, Frazier M, Venter JC ( Март 2007 г.). «Экспедиция по отбору проб мирового океана Sorcerer II: расширение вселенной белковых семейств». PLOS Биология. 5 (3): e16. Дои:10.1371 / journal.pbio.0050016. ЧВК  1821046. PMID  17355171.
  25. ^ а б c де Ланге О., Вольф С., Тиль П., Крюгер Дж., Клеуш С., Кольбахер О., Лахай Т. (ноябрь 2015 г.). «ДНК-связывающие белки морских бактерий расширяют известное разнообразие последовательностей TALE-подобных повторов». Исследования нуклеиновых кислот. 43 (20): 10065–80. Дои:10.1093 / нар / gkv1053. ЧВК  4787788. PMID  26481363.
  26. ^ «Выравнивание Pfam: метагеном PF03377 (автоматически сгенерированное совпадение)». Получено 28 мая 2019.
  27. ^ Бертонати К., Дюшато П., Жюльерат А., Сильва Дж., Валтон Дж. (24 июля 2013 г.). "WO2014018601A2 Новые модульные специфичные к основанию связывающие домены нуклеиновых кислот из белков burkholderia rhizoxinica". Патенты Google.

внешняя ссылка