Фракционирование клеток - Cell fractionation

Фракционирование клеток используется ли процесс для разделения клеточные компоненты при сохранении индивидуальных функций каждого компонента.[1] Это метод, который изначально использовался для демонстрации клеточного местоположения различных биохимических процессов. Другое применение субклеточного фракционирования - обеспечить обогащенный источник белка для дальнейшей очистки и облегчить диагностику различных болезненных состояний.[2]

Гомогенизация

Ткань обычно гомогенизированный в буферный раствор то есть изотонический чтобы остановить осмотическое повреждение. Механизмы гомогенизации включают измельчение, измельчение, измельчение, изменение давления, осмотический шок, замораживание-оттаивание, и ультразвук. Затем образцы хранят в холодном состоянии, чтобы предотвратить повреждение ферментами. Это образование однородной массы клеток (клеточный гомогенат или клеточная суспензия ). Он включает измельчение клеток в подходящей среде в присутствии определенных ферментов с правильным pH, ионным составом и температурой. Например, пектиназа который переваривает средняя пластина среди растительных клеток.

Фильтрация

Этот шаг может не потребоваться в зависимости от источника клетки. Животное ткань однако может образоваться соединительная ткань, которую необходимо удалить. Как правило, фильтрация достигается путем пропускания через марля или с всасывающий фильтр и керамический фильтр соответствующего сорта.

Очищение

Очищение достигается за счет дифференциальное центрифугирование - последовательное увеличение силы тяжести приводит к последовательному разделению органелл по их плотность.

Смотрите также

Среды для разделения клеток по плотности:

Рекомендации

  1. ^ Альбертс, B; Джонсон, А. «Фракционирование клеток». Молекулярная биология клетки. 4-е издание.
  2. ^ Нинфа, Александр Дж. (2010). Фундаментальные лабораторные подходы к биохимии и биотехнологии. Соединенные Штаты Америки: John Wiley & Sons, INC. Стр. 209. ISBN  978-0-470-08766-4.