C2C12 - C2C12

Миотрубки C2C12 под световым микроскопом, 10-кратное увеличение

C2C12 это увековеченный мышь миобласт клеточная линия. Клеточная линия C2C12 представляет собой субклон миобластов, которые были первоначально получены Yaffe и Saxel в Институт науки Вейцмана в Израиле в 1977 году.[1] Разработано для in vitro исследования миобластов, изолированных от сложных взаимодействий in vivo условиях, клетки C2C12 полезны в биомедицинских исследованиях.[2] Эти клетки способны быстро размножаться при высоких сыворотка условия и дифференциация в миобласты в условиях низкого уровня сыворотки. Мононуклеарные миобласты могут позже слиться с образованием многоядерных мышечных трубок в условиях низкого уровня сыворотки или голодания, что приводит к предшественникам сократительных клеток скелетных мышц в процессе миогенез.[3] Клетки C2C12 используются для изучения дифференцировки миобластов, остеобласты, и миогенез, чтобы экспрессировать различные целевые белки и исследовать механистические биохимические пути.

Морфология

Дикого типа Клетки C2C12 имеют морфологию радиального ветвления, состоящую из длинных волокон, идущих во многих направлениях. Клетки C2C12 можно культивировать в различных условиях, чтобы вызвать интересующие специфические ответы. Например, благодаря высокой скорости дифференциации и скорости слияния клеточной линии, фибронектин матрицы могут быть помещены на микропланшеты в чашки Петри или колбы для культивирования клеток, чтобы вызвать определенные модели роста, такие как взаимодействие клеток скелетных мышц с внеклеточный матрикс составные части.[4] Введение молекул адгезии может изменить характер роста клеток C2C12 до продольного распределения, проявляющего полярность.[5] Есть много способов регулировать форму миобластов C2C12 генетически и экологически, от стресса до цитоскелет переделка, к факторам роста. Каркас из клеток C2C12 особенно важен для изучения мышечной ткани. регенерация тканей посттравмы или истощение тканей из-за болезни или Реабилитация в ОИТ.

Использование в исследованиях

Было показано, что клетки C2C12 эффективно включают экзогенные кДНК и нуклеиновые кислоты трансфекция. В пилотных исследованиях, первоначально проведенных Yaffe и Saxel, C2C12 были получены путем серийного пассажа миобластов, культивированных из мышцы бедра мышей C3H после травмы раздавливанием. В их исследовании набор клеток C2C12 культивировали от мышей, гомозиготных рецессивных по dy ген. У этих мышей был синдром, подобный ранней мышечной дистрофии человека. Нормальные миобласты мышей культивировали от двухмесячных мышей C3H после травмы раздавливанием. В течение двух дней нормальные клетки дифференцировались в веретеновидные мононуклеарные миобласты. Через четыре дня образовались многоядерные сети миотрубок, а через несколько дней после этого образовались сети. саркомеры и Z-линии можно было наблюдать.[6] Напротив, дистрофические клетки образовывали укороченные волокна, покрытые фибробласты, признак истощения мышц.[1]

Клетки C2C12 демонстрируют быстрое развитие и созревание в функциональные клетки скелетных мышц или же клетки сердечной мышцы, имеющий способность сокращаться и генерировать силу.[6] Скорость образования мышц из клеток C2C12 можно контролировать путем введения генов потери функций, жизненно важных для слияния миобластов и миогенеза.[7] В некротических условиях, таких как фактор некроза опухоли альфа (TNF-α ), прямая потеря белка, особенно тяжелая цепь миозина белок в клетках скелетных мышц C2C12.[8] Клетки C2C12 использовали для выяснения инактивированных Х хромосома (Xi) репликация на ранней стадии S-фаза клеточного цикла и регулируется эпигенетически.[9] Клетки C2C12 особенно удобны для изучения клеточного цикла из-за высокой скорости деления.

Рекомендации

  1. ^ а б Яффе, Дэвид; Саксель, Ора (1977-12-22). «Последовательный пассаж и дифференцировка миогенных клеток, выделенных из дистрофических мышц мышей». Природа. 270 (5639): 725–727. Bibcode:1977Натура.270..725Y. Дои:10.1038 / 270725a0. ISSN  0028-0836. PMID  563524.
  2. ^ «Клеточная линия C2C12». Получено 12 июля 2018.
  3. ^ «Работа с линией клеток C2C12». Исследования миогенеза. 2012-02-04. Получено 2017-05-03.
  4. ^ Баджадж, Пиюш; Редди, Бобби; Миллет, Ларри; Вэй, Чунань; Зорлутуна, Пинар; Бао, банда; Башир, Рашид (01.09.2011). «Моделирование дифференцировки скелетных миобластов C2C12». Интегративная биология. 3 (9): 897–909. Дои:10.1039 / c1ib00058f. ISSN  1757-9708. PMID  21842084.
  5. ^ Мермельштейн, К.С. (5 мая 2003 г.). «Изменения формы клеток, белков цитоскелета и участков адгезии культивируемых клеток после хелатирования внеклеточного Ca2 +» (PDF). Бразильский журнал медико-биологических исследований. 36 (8): 1111–1116. Дои:10.1590 / с0100-879x2003000800018. PMID  12886466.
  6. ^ а б McMahon, D.K .; Андерсон, П. А .; Nassar, R .; Bunting, J. B .; Saba, Z .; Oakeley, A.E .; Малуф, Н. Н. (1994-06-01). «Клетки C2C12: биофизические, биохимические и иммуноцитохимические свойства». Американский журнал физиологии. Клеточная физиология. 266 (6): C1795 – C1802. Дои:10.1152 / ajpcell.1994.266.6.c1795. ISSN  0363-6143. PMID  8023908.
  7. ^ Би, Пэнпэн; Рамирес-Мартинес, Андрес; Ли, Хуэй; Каннавино, Джессика; McAnally, John R .; Шелтон, Джон М .; Санчес-Ортис, Эфраин; Бассель-Дуби, Ронда; Олсон, Эрик Н. (21 апреля 2017 г.). «Контроль мышечного образования с помощью миомиксера с микропептидами слияния». Наука. 356 (6335): 323–327. Bibcode:2017Научный ... 356..323B. Дои:10.1126 / science.aam9361. ISSN  1095-9203. ЧВК  5502127. PMID  28386024.
  8. ^ Li, Y. P .; Schwartz, R.J .; Waddell, I.D .; Холлоуэй, Б. Р .; Рид, М. Б. (1998-07-01). «Миоциты скелетных мышц претерпевают потерю белка и реактивную кислородно-опосредованную активацию NF-kappaB в ответ на фактор некроза опухоли альфа». Журнал FASEB. 12 (10): 871–880. Дои:10.1096 / fasebj.12.10.871. ISSN  0892-6638. PMID  9657527.
  9. ^ Casas-Delucchi, Corella S .; Бреро, Алессандро; Ран, Ханс-Петер; Соловей Ирина; Вутц, Антон; Кремер, Томас; Леонхардт, Генрих; Кардозу, М. Кристина (01.03.2011). «Ацетилирование гистонов контролирует динамику репликации неактивной Х-хромосомы». Nature Communications. 2: 222. Bibcode:2011 НатКо ... 2..222С. Дои:10.1038 / ncomms1218. ISSN  2041-1723. ЧВК  3072080. PMID  21364561.

внешняя ссылка